Ga naar de inhoud
NCI-H2122
Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
H2122, H-2122, NCIH2122

Documenten

NCI-H2122

Cell line · Productnummer 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De NCI-H2122 cellijn is een humaan niet-kleincellig longkankermodel (NSCLC) afgeleid van een adenocarcinoompatiënt. Opmerkelijk is de aanwezigheid van een KRAS G12C-mutatie, een kenmerk van NSCLC dat leidt tot constitutieve activering van de MAPK-signaleringsroute. Deze cellijn wordt veel gebruikt in studies die zich richten op therapeutische interventies gericht op KRAS G12C en geassocieerde downstream pathways, met name die waarbij MEK- en ERK-remmers betrokken zijn. Onderzoek met NCI-H2122 heeft de rol van deze cellijn bij het begrijpen van mechanismen van geneesmiddelenresistentie en bij het optimaliseren van combinatietherapieën aangetoond.

Preklinische studies met de NCI-H2122 cellijn hebben het nut aangetoond voor het onderzoeken van resistentie tegen MAPK pathway remmers. CRISPR-screeningbenaderingen hebben bijvoorbeeld MAPK7 (ERK5) geïdentificeerd als een cruciale mediator van reactivering van de pathway na remming door MEK, wat mogelijke combinatiestrategieën suggereert met MEK-remmers zoals cobimetinib en MAPK7-remmers. De lijn dient ook als model voor het evalueren van de werkzaamheid van kleine molecuulremmers, waaronder remmers gericht tegen PI3K en BRAF, die relevant zijn in combinatie met KRAS-specifieke behandelingen.

NCI-H2122 wordt ook gebruikt voor onderzoek naar metabole kwetsbaarheden in NSCLC. Studies hebben serine biosynthese en de folaatcyclus geïmpliceerd als metabole routes die bijdragen aan resistentie tegen doelgerichte therapieën, zoals BRAF-remmers. Metabole modulatoren zoals methotrexaat en serine-deprivatiestrategieën zijn getest op deze cellijn, wat inzichten heeft opgeleverd in het overwinnen van medicijnresistentie en het identificeren van nieuwe metabole doelwitten voor therapeutische toepassing.

Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel-achtig, Lymfoblast-achtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H2122 (Cytion catalogusnummer 305600)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygoot; Mutatie: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozygoot; Mutatie: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met TrypLE Express, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze te resuspenderen en centrifugeer vervolgens gedurende 3 minuten bij 300xg. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
46 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch