NCI-H2122

Linia komórkowa NCI-H2122 to model ludzkiego niedrobnokomórkowego raka płuc (NSCLC) pochodzący od pacjenta z gruczolakorakiem. Wyróżnia się mutacją KRAS G12C, cechą charakterystyczną NSCLC, która prowadzi do konstytutywnej aktywacji szlaku sygnałowego MAPK. Ta linia komórkowa jest szeroko stosowana w badaniach koncentrujących się na interwencjach terapeutycznych ukierunkowanych na KRAS G12C i związane z nim szlaki, w szczególności te obejmujące inhibitory MEK i ERK. Badania wykorzystujące NCI-H2122 podkreśliły jej rolę w zrozumieniu mechanizmów oporności na leki i optymalizacji terapii skojarzonych.

Badania przedkliniczne z wykorzystaniem linii komórkowej NCI-H2122 wykazały jej przydatność w badaniu oporności na inhibitory szlaku MAPK. Na przykład, metody przesiewowe CRISPR zidentyfikowały MAPK7 (ERK5) jako krytyczny mediator reaktywacji szlaku po zahamowaniu MEK, co sugeruje potencjalne strategie kombinowane z wykorzystaniem inhibitorów MEK, takich jak kobimetynib i inhibitory MAPK7. Linia ta służy również jako model do oceny skuteczności drobnocząsteczkowych inhibitorów, w tym tych ukierunkowanych na PI3K i BRAF, które są istotne w połączeniu z terapiami specyficznymi dla KRAS.

NCI-H2122 jest również wykorzystywany do badania podatności metabolicznej w NSCLC. Badania wskazują na biosyntezę seryny i cykl folianowy jako szlaki metaboliczne przyczyniające się do oporności na terapie celowane, takie jak inhibitory BRAF. Modulatory metaboliczne, takie jak metotreksat i strategie pozbawienia seryny, zostały przetestowane na tej linii komórkowej, zapewniając wgląd w przezwyciężanie oporności na leki i identyfikację nowych celów metabolicznych do wykorzystania terapeutycznego.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym