NCI-H2122

NCI-H2122-solulinja on ihmisen ei-pienisoluisen keuhkosyövän (NSCLC) malli, joka on peräisin adenokarsinoomapotilaasta. Se on tunnettu siitä, että siinä on KRAS G12C -mutaatio, joka on NSCLC:n tunnusmerkki ja johtaa MAPK-signalointireitin konstitutiiviseen aktivoitumiseen. Tätä solulinjaa käytetään laajalti tutkimuksissa, joissa keskitytään KRAS G12C:hen ja siihen liittyviin jatkoketjureitteihin kohdistuviin terapeuttisiin toimenpiteisiin, erityisesti tutkimuksissa, joissa käytetään MEK:n ja ERK:n estäjiä. NCI-H2122:ta hyödyntävässä tutkimuksessa on korostettu sen merkitystä lääkeresistenssimekanismien ymmärtämisessä ja yhdistelmähoitojen optimoinnissa.

Prekliiniset tutkimukset, joissa käytetään NCI-H2122-solulinjaa, ovat osoittaneet sen hyödyllisyyden tutkittaessa resistenssiä MAPK-reitin estäjille. Esimerkiksi CRISPR-seulontamenetelmillä MAPK7 (ERK5) on tunnistettu MEK:n eston jälkeisen reaktivoitumisen kriittiseksi välittäjäksi, mikä viittaa mahdollisiin yhdistelmästrategioihin, joissa käytetään MEK:n estäjiä, kuten kobimetinibiä, ja MAPK7:n estäjiä. Linja toimii myös mallina, jonka avulla voidaan arvioida pienten molekyylien inhibiittoreiden tehoa, mukaan lukien PI3K:hon ja BRAF:iin kohdistuvat inhibiittorit, jotka ovat merkityksellisiä yhdessä KRAS-spesifisten hoitojen kanssa.

NCI-H2122-linjaa käytetään myös NSCLC:n metabolisten haavoittuvuuksien tutkimiseen. Tutkimuksissa on todettu, että seriinien biosynteesi ja folaattikierto ovat metabolisia reittejä, jotka edistävät resistenssiä kohdennettuja hoitoja, kuten BRAF:n estäjiä, vastaan. Metabolisia modulaattoreita, kuten metotreksaattia, ja seriinin puutostrategioita on testattu tällä solulinjalla, mikä on antanut tietoa lääkeresistenssin voittamisesta ja uusien metabolisten kohteiden tunnistamisesta terapeuttista hyödyntämistä varten.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa