Skip to content
NCI-H2122
Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
H2122, H-2122, NCIH2122

Documents

NCI-H2122

Cell line · Product number 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים NCI-H2122 הוא מודל של סרטן ריאות לא קטן תאים (NSCLC) בבני אדם, שמקורו בחולה אדנוקרצינומה. הוא בולט בכך שהוא נושא מוטציה KRAS G12C, סימן היכר של NSCLC המוביל להפעלה קונסטיטוטבית של מסלול האיתות MAPK. קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב במחקרים המתמקדים בהתערבויות טיפוליות המכוונות ל-KRAS G12C ולמסלולים נלווים, במיוחד אלה הכרוכים במעכבי MEK ו-ERK. מחקרים המשתמשים ב-NCI-H2122 הדגישו את תפקידו בהבנת מנגנוני עמידות לתרופות ובאופטימיזציה של טיפולים משולבים.

מחקרים פרה-קליניים המשתמשים בקו התאים NCI-H2122 הוכיחו את יעילותו בחקר העמידות למעכבי מסלול MAPK. לדוגמה, גישות סינון CRISPR זיהו את MAPK7 (ERK5) כמתווך קריטי בהפעלה מחדש של המסלול לאחר עיכוב MEK, מה שמרמז על אסטרטגיות שילוב פוטנציאליות המשתמשות במעכבי MEK כמו cobimetinib ומעכבי MAPK7. הקו משמש גם כמודל להערכת היעילות של מעכבי מולקולות קטנות, כולל אלה המכוונים ל-PI3K ו-BRAF, הרלוונטיים בשילוב עם טיפולים ספציפיים ל-KRAS.

NCI-H2122 משמש גם לחקר נקודות תורפה מטבוליות ב-NSCLC. מחקרים קישרו את ביוסינתזת סרין ואת מחזור הפולאט למסלולים מטבוליים התורמים לעמידות כנגד טיפולים ממוקדים, כגון מעכבי BRAF. מודולטורים מטבוליים כמו מתוטרקסט ואסטרטגיות של מניעת סרין נבדקו על קו תאים זה, וסיפקו תובנות לגבי התגברות על עמידות לתרופות וזיהוי מטרות מטבוליות חדשות לניצול טיפולי.

Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל, דמוי לימפוציט

04Identifiers

Citation
NCI-H2122 (מספר קטלוגי Cytion 305600)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), הומוזיגוטי; מוטציה: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), הטרוזיגוטי; מוטציה: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), הטרוזיגוטי

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-TrypLE Express, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים באינקובציה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר האינקובציה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
46 שנים
Ethnicity
קווקזי