NCI-H2122

La linea cellulare NCI-H2122 è un modello di carcinoma polmonare umano non a piccole cellule (NSCLC) derivato da un paziente affetto da adenocarcinoma. Si distingue per la presenza di una mutazione KRAS G12C, un segno distintivo del NSCLC che porta all'attivazione costitutiva della via di segnalazione MAPK. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata in studi incentrati su interventi terapeutici mirati al KRAS G12C e alle vie a valle associate, in particolare quelli che coinvolgono inibitori di MEK ed ERK. La ricerca che utilizza la NCI-H2122 ha evidenziato il suo ruolo nella comprensione dei meccanismi di resistenza ai farmaci e nell'ottimizzazione delle terapie di combinazione.

Gli studi preclinici che utilizzano la linea cellulare NCI-H2122 hanno dimostrato la sua utilità nell'esplorare la resistenza agli inibitori della via MAPK. Ad esempio, gli approcci di screening CRISPR hanno identificato MAPK7 (ERK5) come mediatore critico della riattivazione del pathway in seguito all'inibizione di MEK, suggerendo potenziali strategie di combinazione con inibitori di MEK come cobimetinib e inibitori di MAPK7. La linea serve anche come modello per valutare l'efficacia degli inibitori di piccole molecole, compresi quelli diretti contro PI3K e BRAF, che sono rilevanti in combinazione con i trattamenti specifici per KRAS.

L'NCI-H2122 è anche utilizzato per studiare le vulnerabilità metaboliche nel NSCLC. Gli studi hanno coinvolto la biosintesi della serina e il ciclo dei folati come vie metaboliche che contribuiscono alla resistenza alle terapie mirate, come gli inibitori di BRAF. Su questa linea cellulare sono stati testati modulatori metabolici come il metotrexato e strategie di privazione della serina, che hanno fornito indicazioni per superare la resistenza ai farmaci e identificare nuovi bersagli metabolici da sfruttare a fini terapeutici.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia