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NCI-H2122
Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
H2122, H-2122, NCIH2122

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NCI-H2122

Cell line · Artikelnummer 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie NCI-H2122 ist ein menschliches Modell für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs (NSCLC), das von einem Adenokarzinompatienten stammt. Sie zeichnet sich dadurch aus, dass sie eine KRAS-G12C-Mutation trägt, ein Kennzeichen von NSCLC, das zu einer konstitutiven Aktivierung des MAPK-Signalwegs führt. Diese Zelllinie wird häufig in Studien verwendet, die sich mit therapeutischen Maßnahmen befassen, die auf KRAS G12C und damit verbundene nachgeschaltete Signalwege abzielen, insbesondere mit MEK- und ERK-Inhibitoren. Die Forschung mit NCI-H2122 hat ihre Rolle beim Verständnis von Arzneimittelresistenzmechanismen und bei der Optimierung von Kombinationstherapien hervorgehoben.

Präklinische Studien unter Verwendung der NCI-H2122-Zelllinie haben ihren Nutzen bei der Erforschung der Resistenz gegen MAPK-Signalweg-Inhibitoren gezeigt. So wurde beispielsweise durch CRISPR-Screening-Ansätze MAPK7 (ERK5) als entscheidender Vermittler der Reaktivierung des Signalwegs nach einer MEK-Inhibition identifiziert, was auf mögliche Kombinationsstrategien mit MEK-Inhibitoren wie Cobimetinib und MAPK7-Inhibitoren hindeutet. Die Linie dient auch als Modell für die Bewertung der Wirksamkeit von niedermolekularen Inhibitoren, einschließlich derjenigen, die auf PI3K und BRAF abzielen und die in Kombination mit KRAS-spezifischen Behandlungen relevant sind.

NCI-H2122 wird auch bei der Untersuchung von Stoffwechselanfälligkeiten bei NSCLC eingesetzt. Studien haben ergeben, dass die Serinbiosynthese und der Folatzyklus als Stoffwechselwege zur Resistenz gegen zielgerichtete Therapien wie BRAF-Inhibitoren beitragen. Stoffwechselmodulatoren wie Methotrexat und Strategien zum Entzug von Serin wurden an dieser Zelllinie getestet, was Einblicke in die Überwindung von Arzneimittelresistenzen und die Identifizierung neuer Stoffwechselziele für die therapeutische Nutzung ermöglicht.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial-ähnlich, Lymphoblasten-ähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H2122 (Cytion-Katalognummer 305600)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozygot; Mutation: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Verwenden Sie für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml. Bedecken Sie dann die Zellen vollständig mit TrypLE Express, wobei Sie 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwenden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
46 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch