NCI-H2122

Az NCI-H2122 sejtvonal egy emberi nem kissejtes tüdőrák (NSCLC) modell, amely egy adenokarcinómás betegből származik. Különlegessége, hogy a KRAS G12C mutációt hordozza, amely az NSCLC egyik jellemzője, és a MAPK jelátviteli útvonal konstitutív aktiválódásához vezet. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a KRAS G12C-t és a kapcsolódó downstream útvonalakat célzó terápiás beavatkozásokra összpontosító vizsgálatokban, különösen a MEK- és ERK-gátlókat érintő vizsgálatokban. Az NCI-H2122-t használó kutatások rávilágítottak annak szerepére a gyógyszerrezisztencia mechanizmusainak megértésében és a kombinált terápiák optimalizálásában.

Az NCI-H2122 sejtvonalon végzett preklinikai vizsgálatok bizonyították, hogy az NCI-H2122 hasznos a MAPK-útvonal gátlóival szembeni rezisztencia feltárásában. A CRISPR-szűrési megközelítések például a MEK-gátlást követően a MAPK7-et (ERK5) az útvonal reaktiválásának kritikus közvetítőjeként azonosították, ami a MEK-gátlók, például a kobimetinib és a MAPK7-gátlók felhasználásával lehetséges kombinációs stratégiákra utal. A vonal modellként is szolgál a KRAS-specifikus kezelésekkel kombinálva releváns kis molekulájú gátlók hatékonyságának értékeléséhez, beleértve a PI3K és BRAF ellen ható gátlókat is.

Az NCI-H2122-t az NSCLC metabolikus sebezhetőségének vizsgálatában is alkalmazzák. A vizsgálatok szerint a szerin bioszintézis és a folsavciklus olyan metabolikus útvonalak, amelyek hozzájárulnak a célzott terápiákkal, például a BRAF-gátlókkal szembeni rezisztenciához. Ezen a sejtvonalon olyan anyagcsere-modulátorokat, mint a metotrexát és szerin-deprivációs stratégiákat teszteltek, amelyek betekintést nyújtanak a gyógyszerrezisztencia leküzdésébe és a terápiás célpontok azonosításába.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban