Gå direkte til indholdet
NCI-H2122
Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
H2122, H-2122, NCIH2122

Dokumenter

NCI-H2122

Cell line · Varenummer 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCI-H2122-cellelinjen er en human ikke-småcellet lungekræftmodel (NSCLC), der stammer fra en adenokarcinom-patient. Den er kendt for at have en KRAS G12C-mutation, et kendetegn ved NSCLC, der fører til konstitutiv aktivering af MAPK-signalvejen. Denne cellelinje bruges i vid udstrækning i undersøgelser, der fokuserer på terapeutiske indgreb rettet mod KRAS G12C og tilknyttede downstream-veje, især dem, der involverer MEK- og ERK-inhibitorer. Forskning, der anvender NCI-H2122, har fremhævet dens rolle i forståelsen af mekanismer for lægemiddelresistens og i optimeringen af kombinationsbehandlinger.

Prækliniske undersøgelser med NCI-H2122-cellelinjen har vist, at den er velegnet til at udforske resistens over for MAPK-hæmmere. For eksempel har CRISPR-screeningsmetoder identificeret MAPK7 (ERK5) som en kritisk mediator for reaktivering af pathway efter MEK-hæmning, hvilket tyder på potentielle kombinationsstrategier med MEK-hæmmere som cobimetinib og MAPK7-hæmmere. Linjen fungerer også som en model til evaluering af effekten af små molekylehæmmere, herunder dem, der er rettet mod PI3K og BRAF, som er relevante i kombination med KRAS-specifikke behandlinger.

NCI-H2122 bruges også til at undersøge metaboliske sårbarheder i NSCLC. Undersøgelser har impliceret serinbiosyntese og folatcyklus som metaboliske veje, der bidrager til resistens over for målrettede behandlinger, såsom BRAF-hæmmere. Metaboliske modulatorer som methotrexat og serindeprivationsstrategier er blevet testet på denne cellelinje, hvilket giver indsigt i, hvordan man overvinder lægemiddelresistens og identificerer nye metaboliske mål for terapeutisk udnyttelse.

Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende, Lymfoblast-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H2122 (Cytion katalognummer 305600)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozygot; Mutation: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozygot

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS uden calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med TrypLE Express, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
46 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk