Gå direkt till innehållet
NCI-H2122
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Pleurautgjutning
Synonymer
H2122, H-2122, NCIH2122

NCI-H2122

Cell line · Produktnummer 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen NCI-H2122 är en modell för icke-småcellig lungcancer (NSCLC) hos människa som härrör från en adenokarcinompatient. Den är känd för att ha en KRAS G12C-mutation, ett kännetecken för NSCLC som leder till konstitutiv aktivering av MAPK-signalvägen. Denna cellinje används i stor utsträckning i studier som fokuserar på terapeutiska interventioner riktade mot KRAS G12C och associerade nedströmsvägar, särskilt sådana som involverar MEK- och ERK-hämmare. Forskning som använder NCI-H2122 har belyst dess roll när det gäller att förstå mekanismerna bakom läkemedelsresistens och att optimera kombinationsbehandlingar.

Prekliniska studier med cellinjen NCI-H2122 har visat att den är användbar för att utforska resistens mot hämmare av MAPK-vägen. Till exempel har CRISPR-screeningmetoder identifierat MAPK7 (ERK5) som en kritisk mediator för reaktivering av signalvägen efter MEK-hämning, vilket tyder på potentiella kombinationsstrategier med MEK-hämmare som cobimetinib och MAPK7-hämmare. Linjen fungerar också som en modell för att utvärdera effekten av småmolekylära hämmare, inklusive sådana som är inriktade på PI3K och BRAF, vilka är relevanta i kombination med KRAS-specifika behandlingar.

NCI-H2122 används också för att undersöka metaboliska sårbarheter i NSCLC. Studier har visat att serinbiosyntesen och folatcykeln är metaboliska vägar som bidrar till resistens mot riktade behandlingar, t.ex. BRAF-hämmare. Metaboliska modulatorer som metotrexat och strategier för serinbrist har testats på denna cellinje, vilket har gett insikter om hur man övervinner läkemedelsresistens och identifierar nya metaboliska mål för terapeutiskt utnyttjande.

Vävnad
Lungan
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Pleurautgjutning
Synonymer
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande, Lymfoblastliknande

04Identifierare

Källa
NCI-H2122 (Cytion katalognummer 305600)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozygot; Mutation: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozygot

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med TrypLE Express, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
46 år
Etnicitet
Kaukasisk