Preskoči na vsebino
NCI-H2122
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Adenokarcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
H2122, H-2122, NCIH2122

Dokumenti

NCI-H2122

Cell line · Številka izdelka 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija NCI-H2122 je model človeškega nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC), pridobljen iz bolnika z adenokarcinomom. Odlikuje jo mutacija KRAS G12C, ki je značilna za NSCLC in povzroča konstitutivno aktivacijo signalne poti MAPK. Ta celična linija se pogosto uporablja v študijah, ki se osredotočajo na terapevtske posege, usmerjene na KRAS G12C in povezane nadaljnje poti, zlasti tiste, ki vključujejo zaviralce MEK in ERK. Raziskave, v katerih se uporablja NCI-H2122, so poudarile njeno vlogo pri razumevanju mehanizmov odpornosti na zdravila in optimizaciji kombiniranih terapij.

Predklinične študije z uporabo celične linije NCI-H2122 so pokazale njeno uporabnost pri raziskovanju odpornosti na zaviralce poti MAPK. Na primer, s pristopi CRISPR za presejanje so ugotovili, da je MAPK7 (ERK5) ključni posrednik reaktivacije poti po zaviranju MEK, kar kaže na možne kombinacijske strategije z uporabo zaviralcev MEK, kot je kobimetinib, in zaviralcev MAPK7. Linija služi tudi kot model za ocenjevanje učinkovitosti zaviralcev majhnih molekul, vključno s tistimi, ki so usmerjeni proti PI3K in BRAF, ki so pomembni v kombinaciji z zdravljenjem, specifičnim za KRAS.

Linija NCI-H2122 se uporablja tudi za raziskovanje presnovnih ranljivosti pri NSCLC. Študije so pokazale, da sta biosinteza serina in folatni cikel presnovni poti, ki prispevata k odpornosti proti ciljnim zdravljenjem, kot so zaviralci BRAF. Na tej celični liniji so bili preizkušeni presnovni modulatorji, kot sta metotreksat in strategije za odvzem serina, kar je omogočilo vpogled v premagovanje odpornosti na zdravila in opredelitev novih presnovnih ciljev za terapevtsko uporabo.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Adenokarcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski, limfoblastni

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-H2122 (kataloška številka Cytion 305600)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: Gly12Cys (c.34G>T), homozigotna; mutacija: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigotna: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozigotna; mutacija: p: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozigotna

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice v celoti prekrijte z raztopino TrypLE Express, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
46 let
Etnična pripadnost
Kavkaški