NCI-H2122

A linhagem celular NCI-H2122 é um modelo de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) humano, derivado de um paciente com adenocarcinoma. Ela se destaca por apresentar a mutação KRAS G12C, uma característica marcante do NSCLC que leva à ativação constitutiva da via de sinalização MAPK. Essa linha celular é amplamente utilizada em estudos focados em intervenções terapêuticas direcionadas ao KRAS G12C e às vias a jusante associadas, particularmente aquelas envolvendo inibidores de MEK e ERK. Pesquisas que utilizam a NCI-H2122 destacaram seu papel na compreensão dos mecanismos de resistência aos medicamentos e na otimização de terapias combinadas.

Estudos pré-clínicos utilizando a linhagem celular NCI-H2122 demonstraram sua utilidade na exploração da resistência a inibidores da via MAPK. Por exemplo, abordagens de triagem com CRISPR identificaram a MAPK7 (ERK5) como um mediador crítico da reativação da via após a inibição da MEK, sugerindo possíveis estratégias de combinação utilizando inibidores da MEK, como o cobimetinibe, e inibidores da MAPK7. A linha também serve como modelo para avaliar a eficácia de inibidores de moléculas pequenas, incluindo aqueles direcionados a PI3K e BRAF, que são relevantes em combinação com tratamentos específicos para KRAS.

A NCI-H2122 também é empregada na investigação de vulnerabilidades metabólicas no NSCLC. Estudos têm apontado a biossíntese da serina e o ciclo do folato como vias metabólicas que contribuem para a resistência contra terapias direcionadas, como os inibidores de BRAF. Moduladores metabólicos, como o metotrexato, e estratégias de privação de serina foram testados nessa linhagem celular, proporcionando insights sobre como superar a resistência aos medicamentos e identificar novos alvos metabólicos para exploração terapêutica.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.