Премини към съдържанието
NCI-H2122
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
H2122, H-2122, NCIH2122

Документи

NCI-H2122

Cell line · Номер на продукта 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия NCI-H2122 е модел на човешки недребноклетъчен рак на белия дроб (НДКБД), получен от пациент с аденокарцином. Тя се отличава с това, че е носител на мутация G12C на KRAS, отличителен белег на NSCLC, която води до конститутивно активиране на сигналния път MAPK. Тази клетъчна линия се използва широко в проучвания, насочени към терапевтични интервенции, насочени към KRAS G12C и свързаните с него пътища надолу по веригата, особено тези, включващи инхибитори на MEK и ERK. Изследванията, в които се използва NCI-H2122, подчертават ролята ѝ за разбиране на механизмите на лекарствена резистентност и за оптимизиране на комбинираните терапии.

Предклиничните проучвания, използващи клетъчната линия NCI-H2122, демонстрират нейната полезност за изследване на резистентността към инхибитори на MAPK пътя. Например подходите за CRISPR скрининг са идентифицирали MAPK7 (ERK5) като критичен медиатор за реактивиране на пътя след инхибиране на MEK, което предполага потенциални комбинирани стратегии, използващи инхибитори на MEK като кобиметиниб и инхибитори на MAPK7. Линията служи и като модел за оценка на ефикасността на инхибитори с малки молекули, включително такива, насочени към PI3K и BRAF, които са подходящи в комбинация с KRAS-специфични лечения.

NCI-H2122 се използва и за изследване на метаболитните уязвимости при NSCLC. Проучванията показват, че биосинтезата на серина и фолатният цикъл са метаболитни пътища, които допринасят за резистентността към целеви терапии, като например инхибитори на BRAF. Върху тази клетъчна линия са тествани метаболитни модулатори като метотрексат и стратегии за лишаване от серин, което дава представа за преодоляване на лекарствената резистентност и идентифициране на нови метаболитни цели за терапевтично използване.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиални, лимфобластни

04Идентификатори

Източник
NCI-H2122 (каталожен номер 305600 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1531

05Проява и предразположеност

Мутационен профил
Мутация: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), хомозиготен; Мутация: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), хетерозиготен; Мутация: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), хетерозиготна

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с TrypLE Express, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
46 години
Етническа принадлежност
Кавказки