NCI-H2122

Buněčná linie NCI-H2122 je model lidského nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) odvozený od pacienta s adenokarcinomem. Vyznačuje se tím, že je nositelem mutace KRAS G12C, která je charakteristickým znakem NSCLC a vede ke konstitutivní aktivaci signální dráhy MAPK. Tato buněčná linie je hojně využívána ve studiích zaměřených na terapeutické zásahy zaměřené na KRAS G12C a související následné dráhy, zejména ty, které zahrnují inhibitory MEK a ERK. Výzkum využívající NCI-H2122 zdůraznil její úlohu při pochopení mechanismů rezistence vůči lékům a při optimalizaci kombinovaných terapií.

Předklinické studie využívající buněčnou linii NCI-H2122 prokázaly její užitečnost při zkoumání rezistence vůči inhibitorům dráhy MAPK. Například screeningové přístupy CRISPR identifikovaly MAPK7 (ERK5) jako kritický mediátor reaktivace dráhy po inhibici MEK, což naznačuje potenciální kombinační strategie využívající inhibitory MEK, jako je kobimetinib, a inhibitory MAPK7. Tato linie rovněž slouží jako model pro hodnocení účinnosti inhibitorů malých molekul, včetně inhibitorů zaměřených na PI3K a BRAF, které jsou relevantní v kombinaci s léčbou specifickou pro KRAS.

Linie NCI-H2122 se rovněž používá při zkoumání metabolických zranitelností u NSCLC. Studie ukázaly, že biosyntéza serinu a folátový cyklus jsou metabolické dráhy, které přispívají k rezistenci vůči cílené léčbě, jako jsou inhibitory BRAF. Na této buněčné linii byly testovány metabolické modulátory, jako je methotrexát, a strategie deprivace serinu, což poskytlo poznatky o překonávání rezistence k lékům a identifikaci nových metabolických cílů pro terapeutické využití.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení