Mine otse sisu juurde
NCI-H2122
Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
H2122, H-2122, NCIH2122

Dokumendid

NCI-H2122

Cell line · Toote number 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H2122 rakuliin on inimese mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) mudel, mis on saadud adenokartsinoomiga patsiendilt. See on tähelepanuväärne selle poolest, et selles on KRAS G12C mutatsioon, mis on NSCLC tunnusjoon, mis viib MAPK-signaaltee konstitutiivsele aktiveerimisele. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt uuringutes, mis keskenduvad KRAS G12C ja sellega seotud allavoolu radadele suunatud terapeutilistele sekkumistele, eelkõige MEK- ja ERK-inhibiitoritega seotud uuringutele. NCI-H2122 kasutades tehtud uuringud on rõhutanud selle rolli ravimresistentsuse mehhanismide mõistmisel ja kombinatsiooniteraapiate optimeerimisel.

NCI-H2122 rakuliini kasutamisega tehtud prekliinilised uuringud on näidanud selle kasulikkust MAPK raja inhibiitorite suhtes resistentsuse uurimisel. Näiteks on CRISPR-skriiningu meetoditega tuvastatud MAPK7 (ERK5) kui MEK inhibeerimise järgse raja reaktiveerimise kriitiline vahendaja, mis viitab võimalikele kombineeritud strateegiatele, milles kasutatakse MEK-inhibiitoreid, nagu kobimetiniib, ja MAPK7 inhibiitoreid. See liin toimib ka mudelina väikeste molekulide inhibiitorite, sealhulgas PI3K-le ja BRAF-le suunatud inhibiitorite tõhususe hindamiseks, mis on olulised kombinatsioonis KRAS-spetsiifiliste ravimeetoditega.

NCI-H2122 kasutatakse ka NSCLC metaboolsete haavatavuste uurimisel. Uuringud on näidanud, et seriini biosüntees ja folaatsükkel on metaboolsed teed, mis aitavad kaasa resistentsusele suunatud ravimeetodite, näiteks BRAF-inhibiitorite suhtes. Metaboolseid modulaatoreid, nagu metotreksaat ja seriini puudumise strateegiad, on katsetatud selle rakuliini peal, mis annab ülevaate ravimresistentsuse ületamisest ja uute metaboolsete sihtmärkide tuvastamisest raviks.

Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed, lümfoblastilaadsed

04Tunnused

Viide
NCI-H2122 (Cytioni katalooginumber 305600)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homosügootne; Mutatsioon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homosügootne: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterosügootne; Mutatsioon: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
46 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia