Gå til innholdet
NCI-H2122
Vev
Lunge
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
H2122, H-2122, NCIH2122

Dokumenter

NCI-H2122

Cell line · Produktnummer 305600

The NCI-H2122 cell line is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) model derived from an adenocarcinoma patient. It is notable for its harboring of a K...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NCI-H2122-cellelinjen er en human ikke-småcellet lungekreftmodell (NSCLC) som stammer fra en adenokarsinompasient. Den er kjent for å ha en KRAS G12C-mutasjon, et kjennetegn ved NSCLC som fører til konstitutiv aktivering av MAPK-signalveien. Denne cellelinjen brukes i stor utstrekning i studier som fokuserer på terapeutiske intervensjoner rettet mot KRAS G12C og tilhørende nedstrømsveier, særlig de som involverer MEK- og ERK-hemmere. Forskning med NCI-H2122 har fremhevet cellelinjens rolle i forståelsen av resistensmekanismer og i optimaliseringen av kombinasjonsbehandlinger.

Prekliniske studier med NCI-H2122-cellelinjen har vist at den er velegnet til å utforske resistens mot MAPK-veishemmere. For eksempel har CRISPR-screening identifisert MAPK7 (ERK5) som en kritisk mediator for reaktivering av signalveien etter MEK-hemming, noe som tyder på potensielle kombinasjonsstrategier med MEK-hemmere som cobimetinib og MAPK7-hemmere. Linjen fungerer også som en modell for å evaluere effekten av småmolekylære hemmere, inkludert de som er rettet mot PI3K og BRAF, som er relevante i kombinasjon med KRAS-spesifikke behandlinger.

NCI-H2122 brukes også til å undersøke metabolske sårbarheter i NSCLC. Studier har vist at serinbiosyntese og folatsyklusen er metabolske veier som bidrar til resistens mot målrettede behandlinger, for eksempel BRAF-hemmere. Metabolske modulatorer som metotreksat og serindeprivasjonsstrategier har blitt testet på denne cellelinjen, noe som har gitt innsikt i hvordan man kan overvinne legemiddelresistens og identifisere nye metabolske mål for terapeutisk utnyttelse.

Vev
Lunge
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
  • H2122
  • H-2122
  • NCIH2122

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende, Lymfoblast-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H2122 (Cytion-katalognummer 305600)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1531

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutasjon: TP53, p.Gln16Leu (c.47A>T), heterozygot; Mutasjon: TP53, p.Cys176Phe (c.527G>T), heterozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber, og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med TrypLE Express, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
46 år
Etnisitet
Kaukasisk