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SK-GT-4
Tissu
Œsophage distal
Maladie
adénocarcinome
Synonymes
SKGT4, SK4

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SK-GT-4

Cell line · Référence du produit 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire SK-GT-4 est un modèle d'adénocarcinome œsophagien humain dérivé d'un adénocarcinome primaire survenu dans le cadre d'une métaplasie de Barrett dysplasique de l'œsophage distal. Cette lignée cellulaire fait partie de la série SK-GT mise au point au Memorial Sloan-Kettering Cancer Center et a joué un rôle déterminant dans l'étude de la progression de l'œsophage de Barrett vers l'adénocarcinome œsophagien. Les cellules SK-GT-4 présentent des caractéristiques épithéliales et constituent un outil précieux pour l'étude des mécanismes moléculaires du cancer de l'œsophage, en particulier ceux impliquant des mutations du gène suppresseur de tumeur p53.

Des études génomiques menées sur la lignée SK-GT-4 ont mis en évidence une mutation du gène TP53, plus précisément une transition G-A au niveau du codon 175 de l’exon 5, entraînant une substitution d’arginine en histidine. Cette mutation a été associée à une chimiorésistance aux agents endommageant l’ADN, tels que le 5-fluorouracile, la mitomycine C et le cisplatine. Des études indiquent que le statut mutationnel de p53 a un impact significatif sur la réponse cellulaire à la chimiothérapie, en influençant la régulation du cycle cellulaire et l’apoptose dans les cellules SK-GT-4. Ces caractéristiques font de cette lignée cellulaire un modèle essentiel pour l’exploration de stratégies thérapeutiques ciblant les voies associées à p53.

La lignée SK-GT-4 a été utilisée pour évaluer le potentiel d’invasion tumorale et la réponse aux facteurs de croissance dans l’adénocarcinome de l’œsophage. Cette lignée cellulaire a démontré des capacités invasives lors de tests en chambre de Boyden, soulignant ainsi sa pertinence pour l’étude des métastases. La lignée SK-GT-4 exprime également des transcrits de divers facteurs de croissance, notamment le TGF-β et le facteur de croissance dérivé des plaquettes, qui contribuent à son phénotype agressif. Le rôle bien établi de cette lignée cellulaire dans la recherche translationnelle souligne son utilité tant en biologie fondamentale du cancer que dans le développement de médicaments.

Tissu
Œsophage distal
Maladie
adénocarcinome
Synonymes
  • SKGT4
  • SK4

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellule épithéliale
Temps de doublement
30 à 35 heures

04Identifiants

Référence
SK-GT-4 (référence Cytion 305454)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Expression et sensibilité

Profil mutationnel
Mutation : KRAS, simple, p.Gly12Ala (c.35G>C), hétérozygote ; Mutation : PIK3CA, simple, p.Glu542Lys (c.1624G>A), hétérozygote ; Mutation : TP53, simple, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozygote
Virus
EBV -, HBV -, HCV -, VIH-1 -, VIH-2 -, HPV -, HTLV-I/-II -, MLV -

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.1 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2-4 × 10⁴/cm²
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
89 ans
Origine ethnique
Caucasien