Pereiti prie turinio
SK-GT-4
Audinys
Stemplė, distalinė dalis
Liga
adenokarcinoma
Sinonimai
SKGT4, SK4

Dokumentai

SK-GT-4

Cell line · Prekės numeris 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SK-GT-4 ląstelių linija yra žmogaus stemplės adenokarcinomos modelis, gautas iš pirminės adenokarcinomos, susidariusios distalinės stemplės displastinėje Bareto metaplazijoje. Ši ląstelių linija priklauso SK-GT serijai, sukurtai Memorial Sloan-Kettering vėžio centre, ir buvo labai svarbi tiriant Barrett sindromo progresavimą į stemplės adenokarcinomą. SK-GT-4 ląstelės pasižymi epitelinėmis savybėmis ir yra vertinga priemonė stemplės vėžio molekulinių mechanizmų tyrimams, ypač tiems, kuriuose dalyvauja p53 naviko slopinančio geno mutacijos.

Atlikus SK-GT-4 genominius tyrimus, buvo nustatyta TP53 geno mutacija, būtent G į A perėjimas 5-ojo eksono 175-ajame kodone, dėl kurio argininas pakeičiamas į histidiną. Ši mutacija siejama su atsparumu chemoterapijai, kai naudojami DNR pažeidžiantys vaistai, tokie kaip 5-fluorouracilas, mitomicinas C ir cisplatinas. Tyrimai rodo, kad p53 mutacijų būklė daro reikšmingą poveikį ląstelių reakcijai į chemoterapiją, veikdama ląstelių ciklo reguliavimą ir apoptozę SK-GT-4 ląstelėse. Dėl šių savybių ši ląstelių linija yra svarbus modelis, skirtas tirti terapines strategijas, nukreiptas į su p53 susijusius signalinius kelius.

SK-GT-4 buvo naudojama siekiant įvertinti naviko invazijos potencialą ir reakciją į augimo veiksnius stemplės adenokarcinomoje. Ši ląstelių linija parodė invazinius gebėjimus atliekant Boydeno kameros tyrimus, o tai pabrėžia jos svarbą metastazių tyrimams. SK-GT-4 taip pat ekspresuoja įvairių augimo veiksnių, įskaitant TGF-β ir trombocitų kilmės augimo veiksnį, transkriptus, kurie prisideda prie jos agresyvaus fenotipo. Šios ląstelių linijos įsitvirtinęs vaidmuo translaciniuose tyrimuose pabrėžia jos naudą tiek fundamentaliuose vėžio biologijos tyrimuose, tiek vaistų kūrime.

Audinys
Stemplė, distalinė dalis
Liga
adenokarcinoma
Sinonimai
  • SKGT4
  • SK4

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelinė ląstelė
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
30–35 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
SK-GT-4 (Cytion katalogo numeris 305454)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: KRAS, paprasta, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigotinė; Mutacija: PIK3CA, paprasta, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterozigotinė; Mutacija: TP53, paprasta, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozigotinė
Virusai
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,1 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–4 × 10⁴/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
89 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių