Prejsť na obsah
SK-GT-4
Tkanivo
Jazýček, distálny
Choroba
adenokarcinóm
Synonymá
SKGT4, SK4

Dokumenty

SK-GT-4

Cell line · Číslo výrobku 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka SK-GT-4 je model ľudského adenokarcinómu pažeráka odvodený z primárneho adenokarcinómu, ktorý vznikol v dysplastickej Barrettovej metaplázii distálnej časti pažeráka. Táto bunková línia je súčasťou série SK-GT vytvorenej v Memorial Sloan-Kettering Cancer Center a zohrala kľúčovú úlohu pri štúdiu progresie Barrettovho pažeráka do adenokarcinómu pažeráka. Bunky SK-GT-4 vykazujú epiteliálne charakteristiky a slúžia ako cenný nástroj na skúmanie molekulárnych mechanizmov rakoviny pažeráka, najmä tých, ktoré zahŕňajú mutácie tumor-supresorového génu p53.

Genomické štúdie línie SK-GT-4 identifikovali mutáciu v géne TP53, konkrétne prechod z G na A v kodóne 175 v exóne 5, čo vedie k substitúcii arginínu za histidín. Táto mutácia bola spojená s chemorezistenciou voči látkam poškodzujúcim DNA, ako sú 5-fluóruracil, mitomycín C a cisplatina. Štúdie naznačujú, že mutačný stav génu p53 významne ovplyvňuje bunkovú odpoveď na chemoterapiu, pričom pôsobí na reguláciu bunkového cyklu a apoptózu v bunkách SK-GT-4. Vďaka týmto vlastnostiam je táto bunková línia kľúčovým modelom pre skúmanie terapeutických stratégií zameraných na signálne dráhy spojené s p53.

SK-GT-4 sa využíva na hodnotenie invazívneho potenciálu nádoru a reakcie na rastové faktory pri adenokarcinóme pažeráka. Táto bunková línia preukázala invazívne schopnosti v testoch s Boydenovou komorou, čo zdôrazňuje jej význam pre štúdium metastázovania. SK-GT-4 tiež exprimuje transkripty rôznych rastových faktorov, vrátane TGF-β a rastového faktoru derivovaného z krvných doštičiek, ktoré prispievajú k jej agresívnemu fenotypu. Uznaná úloha tejto bunkovej línie v translačnom výskume podčiarkuje jej užitočnosť tak v základnej biológii rakoviny, ako aj vo vývoji liekov.

Tkanivo
Jazýček, distálny
Choroba
adenokarcinóm
Synonymá
  • SKGT4
  • SK4

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelová bunka
Doba zdvojnásobenia
30–35 hodín

04Identifikátory

Citácia
SK-GT-4 (katalógové číslo Cytion 305454)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: KRAS, jednoduchá, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygotná; Mutácia: PIK3CA, jednoduchá, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterozygotná; Mutácia: TP53, jednoduchá, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozygotná
Vírusy
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HPV -, HTLV-I/-II -, MLV -

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
89 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský