Tartalomra ugrás
SK-GT-4
Szövet
Nyelőcső, disztális része
Betegség
adenokarcinóma
Szinonimák
SKGT4, SK4

Dokumentumok

SK-GT-4

Cell line · Termékszám 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az SK-GT-4 sejtvonal egy humán nyelőcső-adenokarcinóma modell, amelyet a nyelőcső disztális szakaszában előforduló, dysplasiás Barrett-metapláziából kialakuló primer adenokarcinómából nyertek. Ez a sejtvonal a Memorial Sloan-Kettering Rákközpontban létrehozott SK-GT-sorozat része, és meghatározó szerepet játszott a Barrett-nyelőcsőből kialakuló nyelőcső-adenokarcinóma progressziójának vizsgálatában. Az SK-GT-4 sejtek epiteliális jellemzőket mutatnak, és értékes eszközként szolgálnak a nyelőcsőrák molekuláris mechanizmusainak, különösen a p53 tumor-szupresszor gén mutációival kapcsolatos folyamatok vizsgálatához.

Az SK-GT-4-re vonatkozó genomikai vizsgálatok során azonosítottak egy mutációt a TP53 génben, konkrétan egy G-ről A-ra történő átmenetet az 5. exon 175. kodonjában, ami argininról hisztidinra történő szubsztitúciót eredményez. Ezt a mutációt összefüggésbe hozták a DNS-károsító szerekkel – például az 5-fluorouracillal, a mitomicin C-vel és a ciszplatinnal – szembeni kemoterápiás rezisztenciával. A vizsgálatok azt mutatják, hogy a p53 mutációs státusza jelentősen befolyásolja a kemoterápiára adott sejtválaszt, hatással van a sejtciklus szabályozására és az apoptózisra az SK-GT-4 sejtekben. Ezek a tulajdonságok teszik ezt a sejtvonalat kulcsfontosságú modellé a p53-hoz kapcsolódó útvonalakat célzó terápiás stratégiák feltárásához.

Az SK-GT-4-et használták a nyelőcső-adenokarcinómában a tumor inváziós potenciáljának és a növekedési faktorokra adott válasz értékelésére. Ez a sejtvonal invazív képességeket mutatott Boyden-kamrás vizsgálatokban, ami kiemeli jelentőségét a metasztázisok tanulmányozásában. Az SK-GT-4 emellett különböző növekedési faktorok transzkriptjeit is expresszálja, többek között a TGF-β-t és a vérlemezkékből származó növekedési faktort, amelyek hozzájárulnak agresszív fenotípusához. A sejtvonal transzlációs kutatásban betöltött, már megalapozott szerepe aláhúzza hasznosságát mind az alapvető rákbiológiában, mind a gyógyszerfejlesztésben.

Szövet
Nyelőcső, disztális része
Betegség
adenokarcinóma
Szinonimák
  • SKGT4
  • SK4

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithelsejt
Kettőzési idő
30–35 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
SK-GT-4 (Cytion katalógusszám: 305454)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
Mutáció: KRAS, egyszerű, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigóta; Mutáció: PIK3CA, egyszerű, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterozigóta; Mutáció: TP53, egyszerű, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozigóta
Vírusok
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820700a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
89 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi