SK-GT-4

A linhagem celular SK-GT-4 é um modelo de adenocarcinoma esofágico humano derivado de um adenocarcinoma primário originado na metaplasia de Barrett displásica do esôfago distal. Essa linha celular faz parte da série SK-GT estabelecida no Memorial Sloan-Kettering Cancer Center e tem sido fundamental no estudo da progressão do esôfago de Barrett para o adenocarcinoma esofágico. As células SK-GT-4 apresentam características epiteliais e servem como uma ferramenta valiosa para investigar os mecanismos moleculares do câncer de esôfago, particularmente aqueles envolvendo mutações no gene supressor de tumor p53.

Estudos genômicos da SK-GT-4 identificaram uma mutação no gene TP53, especificamente uma transição de G para A no códon 175 do exão 5, resultando na substituição de arginina por histidina. Essa mutação tem sido correlacionada à quimiorresistência a agentes que causam danos ao DNA, como o 5-fluorouracil, a mitomicina C e a cisplatina. Estudos indicam que o status mutacional do p53 impacta significativamente a resposta celular à quimioterapia, influenciando a regulação do ciclo celular e a apoptose nas células SK-GT-4. Essas características tornam essa linhagem celular um modelo essencial para a exploração de estratégias terapêuticas direcionadas às vias associadas ao p53.

A SK-GT-4 tem sido utilizada para avaliar o potencial de invasão tumoral e a resposta a fatores de crescimento no adenocarcinoma de esôfago. Essa linhagem celular demonstrou capacidade invasiva em ensaios de câmara de Boyden, destacando sua relevância para o estudo da metástase. A SK-GT-4 também expressa transcritos de vários fatores de crescimento, incluindo o TGF-β e o fator de crescimento derivado de plaquetas, que contribuem para seu fenótipo agressivo. O papel consolidado da linhagem celular na pesquisa translacional ressalta sua utilidade tanto na biologia básica do câncer quanto no desenvolvimento de medicamentos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.