Gå direkt till innehållet
SK-GT-4
Vävnad
Matstrupen, distala delen
Sjukdom
adenokarcinom
Synonymer
SKGT4, SK4

SK-GT-4

Cell line · Produktnummer 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen SK-GT-4 är en modell för humant adenokarcinom i matstrupen som härrör från ett primärt adenokarcinom som uppstått i dysplastisk Barretts metaplasi i den distala delen av matstrupen. Denna cellinje ingår i SK-GT-serien som etablerats vid Memorial Sloan-Kettering Cancer Center och har spelat en avgörande roll i studierna av utvecklingen från Barretts esofagus till adenokarcinom i matstrupen. SK-GT-4-celler uppvisar epiteliala egenskaper och fungerar som ett värdefullt verktyg för att undersöka molekylära mekanismer vid matstrupscancer, särskilt sådana som involverar mutationer i tumörsuppressorgenen p53.

Genomiska studier av SK-GT-4 har identifierat en mutation i TP53-genen, närmare bestämt en övergång från G till A vid kodon 175 i exon 5, vilket resulterar i en substitution av arginin mot histidin. Denna mutation har korrelerats med kemoresistens mot DNA-skadande medel såsom 5-fluorouracil, mitomycin C och cisplatin. Studier visar att mutationsstatusen för p53 har en betydande inverkan på cellernas respons på kemoterapi, vilket påverkar cellcykelregleringen och apoptosen i SK-GT-4-celler. Dessa egenskaper gör denna cellinje till en viktig modell för att utforska behandlingsstrategier riktade mot p53-associerade signalvägar.

SK-GT-4 har använts för att utvärdera tumörens invasionspotential och respons på tillväxtfaktorer vid adenokarcinom i matstrupen. Denna cellinje har visat invasiva egenskaper i Boyden-kammartester, vilket understryker dess relevans för studier av metastasering. SK-GT-4 uttrycker även transkript för olika tillväxtfaktorer, däribland TGF-β och trombocytderiverad tillväxtfaktor, vilket bidrar till dess aggressiva fenotyp. Cellinjens etablerade roll inom translationell forskning understryker dess användbarhet både inom grundläggande cancerbiologi och läkemedelsutveckling.

Vävnad
Matstrupen, distala delen
Sjukdom
adenokarcinom
Synonymer
  • SKGT4
  • SK4

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epitelial cell
Fördubblingstid
30–35 timmar

04Identifierare

Källa
SK-GT-4 (Cytion-katalognummer 305454)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, enkel, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygot; Mutation: PIK3CA, enkel, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterozygot; Mutation: TP53, enkel, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozygot
Virus
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,1 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2–4 × 10⁴/cm²
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
89 år
Etnicitet
Kaukasisk