Gå til innholdet
SK-GT-4
Vev
Spiserøret, distale del
Sykdom
adenokarsinom
Synonymer
SKGT4, SK4

Dokumenter

SK-GT-4

Cell line · Produktnummer 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

SK-GT-4-cellelinjen er en modell for humant adenokarsinom i spiserøret, avledet fra primært adenokarsinom som oppstår i dysplastisk Barretts metaplasi i den distale delen av spiserøret. Denne cellelinjen er en del av SK-GT-serien etablert ved Memorial Sloan-Kettering Cancer Center og har vært avgjørende for å studere utviklingen fra Barretts spiserør til adenokarsinom i spiserøret. SK-GT-4-celler viser epiteliale egenskaper og fungerer som et verdifullt verktøy for å undersøke molekylære mekanismer ved spiserørskreft, særlig de som involverer mutasjoner i tumorsuppressorgenet p53.

Genomiske studier av SK-GT-4 har identifisert en mutasjon i TP53-genet, nærmere bestemt en G-til-A-overgang ved kodon 175 i ekson 5, noe som resulterer i en substitusjon av arginin til histidin. Denne mutasjonen har blitt korrelert med kjemoresistens mot DNA-skadende midler som 5-fluorouracil, mitomycin C og cisplatin. Studier indikerer at mutasjonsstatusen til p53 har betydelig innvirkning på cellenes respons på kjemoterapi, og påvirker reguleringen av cellesyklusen og apoptose i SK-GT-4-celler. Disse egenskapene gjør denne cellelinjen til en viktig modell for å utforske terapeutiske strategier rettet mot p53-assosierte signalveier.

SK-GT-4 har blitt brukt til å evaluere tumorens invasjonspotensial og respons på vekstfaktorer ved adenokarsinom i spiserøret. Denne cellelinjen har vist invasjonsevne i Boyden-kammer-assayer, noe som understreker dens relevans for studier av metastase. SK-GT-4 uttrykker også transkripter for ulike vekstfaktorer, inkludert TGF-β og blodplateavledet vekstfaktor, som bidrar til dens aggressive fenotype. Cellelinjens etablerte rolle i translasjonsforskning understreker dens nytteverdi både innen grunnleggende kreftbiologi og legemiddelutvikling.

Vev
Spiserøret, distale del
Sykdom
adenokarsinom
Synonymer
  • SKGT4
  • SK4

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelcelle
Fordoblingstid
30–35 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-GT-4 (Cytion-katalognummer 305454)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: KRAS, enkel, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygot; Mutasjon: PIK3CA, enkel, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterozygot; Mutasjon: TP53, enkel, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozygot
Virus
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,1 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2–4 × 10⁴/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
89 år
Etnisitet
Kaukasisk