Přejít na obsah
SK-GT-4
Tkáň
Jícen, distální část
Nemoc
adenokarcinom
Synonyma
SKGT4, SK4

Dokumenty

SK-GT-4

Cell line · Číslo výrobku 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie SK-GT-4 je model lidského adenokarcinomu jícnu odvozený od primárního adenokarcinomu vzniklého v dysplastické Barrettově metaplazii distálního úseku jícnu. Tato buněčná linie je součástí série SK-GT založené v Memorial Sloan-Kettering Cancer Center a sehrála klíčovou roli ve studiu progrese Barrettova jícnu do adenokarcinomu jícnu. Buňky SK-GT-4 vykazují epiteliální charakteristiky a slouží jako cenný nástroj pro zkoumání molekulárních mechanismů rakoviny jícnu, zejména těch, které zahrnují mutace tumor-supresorového genu p53.

Genomické studie linie SK-GT-4 identifikovaly mutaci v genu TP53, konkrétně přechod G na A v kodonu 175 v exonu 5, což vede k substituci argininu za histidin. Tato mutace byla spojena s chemorezistencí vůči látkám poškozujícím DNA, jako jsou 5-fluorouracil, mitomycin C a cisplatina. Studie naznačují, že mutační stav genu p53 významně ovlivňuje buněčnou odezvu na chemoterapii, a to prostřednictvím regulace buněčného cyklu a apoptózy v buňkách SK-GT-4. Díky těmto vlastnostem představuje tato buněčná linie klíčový model pro zkoumání terapeutických strategií zaměřených na signální dráhy spojené s p53.

SK-GT-4 byla využita k hodnocení invazivního potenciálu nádoru a reakce na růstové faktory u adenokarcinomu jícnu. Tato buněčná linie prokázala invazivní schopnosti v testech s Boydenovou komorou, což podtrhuje její význam pro studium metastázování. SK-GT-4 také exprimuje transkripty různých růstových faktorů, včetně TGF-β a růstového faktoru odvozeného z krevních destiček, které přispívají k jejímu agresivnímu fenotypu. Uznaná role této buněčné linie v translačním výzkumu podtrhuje její užitečnost jak v základní biologii rakoviny, tak ve vývoji léčiv.

Tkáň
Jícen, distální část
Nemoc
adenokarcinom
Synonyma
  • SKGT4
  • SK4

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelová buňka
Doba zdvojnásobení
30–35 hodin

04Identifikátory

Citace
SK-GT-4 (katalogové číslo Cytion 305454)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: KRAS, jednoduchá, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygotní; Mutace: PIK3CA, jednoduchá, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterozygotní; Mutace: TP53, jednoduchá, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozygotní
Viry
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HPV -, HTLV-I/-II -, MLV -

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
89 let
Etnická příslušnost
Kavkazský