Skip to content
SK-GT-4
Tissue
הוושט, החלק הדיסטלי
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
SKGT4, SK4

Documents

SK-GT-4

Cell line · Product number 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

US$375.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים SK-GT-4 הוא מודל של אדנוקרצינומה של הוושט האנושי, שמקורו באדנוקרצינומה ראשונית שהתפתחה במטפלזיה של ברט דיספלסטית בחלק הדיסטלי של הוושט. קו תאים זה הוא חלק מסדרת SK-GT שהוקמה במרכז הסרטן Memorial Sloan-Kettering, והוא שימש ככלי מרכזי בחקר ההתקדמות של תסמונת בארט לאדנוקרצינומה של הוושט. תאי SK-GT-4 מפגינים מאפיינים אפיתליאליים ומשמשים ככלי חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים של סרטן הוושט, ובפרט אלה הקשורים למוטציות בגן מדכא הגידול p53.

מחקרים גנומיים של SK-GT-4 זיהו מוטציה בגן TP53, ובאופן ספציפי מעבר מ-G ל-A בקודון 175 באקסון 5, המביא להחלפת ארגינין בהיסטידין. מוטציה זו נקשרה לעמידות לכימותרפיה מול חומרים הפוגעים ב-DNA, כגון 5-פלואורואורציל, מיטומיצין C וציספלטין. מחקרים מצביעים על כך שמצב המוטציות ב-p53 משפיע באופן משמעותי על התגובה התאית לכימותרפיה, ומשפיע על ויסות מחזור התא ועל אפופטוזיס בתאי SK-GT-4. מאפיינים אלה הופכים את קו התאים הזה למודל חיוני לחקר אסטרטגיות טיפוליות המכוונות למסלולים הקשורים ל-p53.

SK-GT-4 שימש להערכת פוטנציאל הפלישה של הגידול ותגובתו לגורמי גדילה באדנוקרצינומה של הוושט. קו תאים זה הפגין יכולות פולשניות בבדיקות תא בוידן, מה שמדגיש את הרלוונטיות שלו לחקר גרורות. SK-GT-4 מבטא גם טרנסקריפטים של גורמי גדילה שונים, כולל TGF-β וגורם גדילה שמקורו בטסיות, התורמים לפנוטיפ האגרסיבי שלו. תפקידו המוכח של קו התאים במחקר תרגומי מדגיש את תועלתו הן בביולוגיה בסיסית של הסרטן והן בפיתוח תרופות.

Tissue
הוושט, החלק הדיסטלי
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • SKGT4
  • SK4

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תא אפיתל
Doubling time
30–35 שעות

04Identifiers

Citation
SK-GT-4 (מספר קטלוג Cytion 305454)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: KRAS, פשוטה, p.Gly12Ala (c.35G>C), הטרוזיגוטית; מוטציה: PIK3CA, פשוטה, p.Glu542Lys (c.1624G>A), הטרוזיגוטית; מוטציה: TP53, פשוטה, p.Gln100Ter (c.298C>T), הומוזיגוטית
Viruses
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.1 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
2–4*10^4/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
89 שנים
Ethnicity
קווקזי