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SK-GT-4
Tissue
食道,遠端
Disease
腺癌
Synonyms
SKGT4, SK4

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SK-GT-4

Cell line · Product number 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

US$375.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

SK-GT-4 細胞系是一種源自遠端食道巴雷特氏異型增生所衍生的原發性腺癌的人類食道腺癌模型。 該細胞系屬於紀念斯隆-凱特琳癌症中心建立的 SK-GT 系列,在研究巴雷特食道進展為食道腺癌的過程中發揮了關鍵作用。 SK-GT-4 細胞具有上皮細胞的特徵,是研究食道癌分子機制(尤其是涉及 p53 腫瘤抑制基因突變的機制)的寶貴工具。

針對 SK-GT-4 的基因組研究已鑑定出 TP53 基因的突變,具體而言是外顯子 5 的第 175 個密碼子處發生 G 轉為 A 的轉變,導致精胺酸替換為組胺酸。 此突變已被證實與對 5-氟尿嘧啶、絲裂酶 C 及順鉑等 DNA 損傷性藥物產生化療抗藥性有關。 研究顯示,p53 的突變狀態會顯著影響 SK-GT-4 細胞對化療的反應,進而影響其細胞週期調控與細胞凋亡。這些特徵使該細胞系成為探索針對 p53 相關路徑之治療策略的關鍵模型。

SK-GT-4 已被用於評估食道腺癌的腫瘤侵襲潛力及其對生長因子的反應。該細胞系在博伊登室實驗中展現出侵襲能力,凸顯其對研究轉移的相關性。 SK-GT-4 亦表達多種生長因子的轉錄本,包括 TGF-β 和血小板衍生生長因子,這些因子促使其呈現侵襲性表型。該細胞系在轉譯研究中已確立的角色,凸顯了其在基礎癌症生物學與藥物開發領域的實用價值。

Tissue
食道,遠端
Disease
腺癌
Synonyms
  • SKGT4
  • SK4

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
上皮樣
Cell type
上皮細胞
Doubling time
30-35 小時

04Identifiers

Citation
SK-GT-4(Cytion 型號 305454)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Expression and susceptibility

Mutational profile
突變:KRAS,單一突變,p.Gly12Ala (c.35G>C),雜合子;突變:PIK3CA,單一突變,p.Glu542Lys (c.1624G>A),雜合子; 突變:TP53,簡單突變,p.Gln100Ter (c.298C>T),純合子
Viruses
EBV 陰性、HBV 陰性、HCV 陰性、HIV-1 陰性、HIV-2 陰性、HPV 陰性、HTLV-I/-II 陰性、MLV 陰性

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.1 mM 穩定型谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
2–4×10⁴/cm²
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
89年
Ethnicity
高加索人