SK-GT-4
Cell line · Toote number 305454
The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...
Kohandamine / Soovitused
- SK-GT-4Cell line€375.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
SK-GT-4 rakuliin on inimese söögitoru adenokartsinoomi mudel, mis on saadud primaarsest adenokartsinoomist, mis tekkis distaalse söögitoru düsplastilise Barretti metaplaasia tagajärjel. See rakuliin kuulub Memorial Sloan-Ketteringi vähikeskuses loodud SK-GT-seeriasse ning on olnud oluline vahend Barrett'i söögitoru progresseerumise uurimisel söögitoru adenokartsinoomiks. SK-GT-4 rakud ilmutavad epiteelirakkudele omaseid tunnuseid ja on väärtuslikuks vahendiks söögitoru vähi molekulaarsete mehhanismide uurimisel, eriti nende puhul, mis hõlmavad p53 kasvajavastase geeni mutatsioone.
SK-GT-4 genoomiuuringud on tuvastanud mutatsiooni TP53-geenis, täpsemalt G-st A-ks ülemineku eksoni 5 kodonis 175, mille tulemuseks on arginiini asendumine histidiiniga. Seda mutatsiooni on seostatud kemoresistentsusega DNA-d kahjustavate ravimite suhtes, nagu 5-fluorouratsiil, mitomütsiin C ja tsisplatiin. Uuringud näitavad, et p53 mutatsioonistaatus mõjutab oluliselt rakkude vastust kemoteraapiale, reguleerides SK-GT-4 rakkude rakutsükli ja apoptoosi. Need omadused muudavad selle rakuliini oluliseks mudeliks p53-ga seotud signaalradadele suunatud ravistrateegiate uurimisel.
SK-GT-4-d on kasutatud söögitoru adenokartsinoomi puhul kasvufaktoritele reageerimise ja kasvaja invasiivsuse hindamiseks. See rakuliin on näidanud invasiivset võimet Boydeni kambri testides, mis rõhutab selle olulisust metastaaside uurimisel. SK-GT-4 ekspresseerib ka mitmesuguste kasvufaktorite transkripte, sealhulgas TGF-β ja trombotsüütidest pärinevat kasvufaktorit, mis aitavad kaasa selle agressiivsele fenotüübile. Selle rakuliini väljakujunenud roll translatsioonilises uurimistöös rõhutab selle kasulikkust nii vähibioloogia alusteaduses kui ka ravimite arendamisel.
- Kude
- Söögitoru distaalne osa
- Haigus
- adenokartsinoom
- Sünonüümid
- SKGT4
- SK4
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 2
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Epiteelirakk
- Kahekordistumisaeg
- 30–35 tundi
04Tunnused
- Viide
- SK-GT-4 (Cytioni katalooginumber 305454)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2195
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Mutatsiooniprofiil
- Mutatsioon: KRAS, lihtne, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterosügootne; Mutatsioon: PIK3CA, lihtne, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterosügootne; Mutatsioon: TP53, lihtne, p.Gln100Ter (c.298C>T), homosügootne
- Viirused
- EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 2–4 × 10⁴/cm²
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 89 aastat
- Etniline kuuluvus
- Kaukaasia
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
.jpg)
