Skip to content
SK-GT-4
Tissue
หลอดอาหารส่วนปลาย
Disease
มะเร็งอะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
SKGT4, SK4

Documents

SK-GT-4

Cell line · Product number 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ SK-GT-4 เป็นแบบจำลองมะเร็งต่อมน้ำเหลืองของหลอดอาหารในมนุษย์ ที่ได้มาจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองขั้นต้น ซึ่งเกิดในภาวะเมตาพลาเซียแบบบาร์เรตต์ที่มีความผิดปกติของเซลล์ในส่วนปลายของหลอดอาหาร สายเซลล์นี้เป็นส่วนหนึ่งของซีรีส์ SK-GT ที่พัฒนาขึ้นที่ศูนย์มะเร็งเมโมเรียล สโลน-เคตเทอริง (Memorial Sloan-Kettering Cancer Center) และมีบทบาทสำคัญในการศึกษาการพัฒนาของโรคหลอดอาหารบาร์เรตต์ไปสู่มะเร็งอะเดโนคาร์ซิโนมาของหลอดอาหาร เซลล์ SK-GT-4 แสดงลักษณะของเซลล์เยื่อบุผิว และทำหน้าที่เป็นเครื่องมือที่มีค่าในการศึกษากลไกระดับโมเลกุลของมะเร็งหลอดอาหาร โดยเฉพาะอย่างยิ่งกลไกที่เกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์ของยีนกดเนื้องอก p53

การศึกษาจีโนมของ SK-GT-4 ได้ระบุการกลายพันธุ์ในยีน TP53 โดยเฉพาะการเปลี่ยนจาก G เป็น A ที่โคดอน 175 ในเอ็กซอน 5 ซึ่งส่งผลให้เกิดการแทนที่อาร์จินีนด้วยฮิสทิดีน การกลายพันธุ์นี้มีความสัมพันธ์กับการต้านทานต่อยาเคมีบำบัดที่ก่อให้เกิดความเสียหายต่อ DNA เช่น 5-fluorouracil, mitomycin C และ cisplatin. การศึกษาชี้ให้เห็นว่า สถานะการกลายพันธุ์ของ p53 มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อปฏิกิริยาของเซลล์ต่อการรักษาด้วยเคมีบำบัด โดยส่งผลต่อการควบคุมวงจรเซลล์และกระบวนการอะพอพโทซิสในเซลล์ SK-GT-4 คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้สายเซลล์นี้กลายเป็นแบบจำลองสำคัญสำหรับการศึกษากลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าไปที่เส้นทางที่เกี่ยวข้องกับ p53

SK-GT-4 ได้ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินศักยภาพการรุกรานของเนื้องอกและการตอบสนองต่อปัจจัยการเจริญเติบโตในมะเร็งต่อมน้ำเหลืองของหลอดอาหาร สายเซลล์นี้ได้แสดงความสามารถในการรุกรานในการทดสอบด้วยห้องบอยเดน ซึ่งเน้นย้ำถึงความสำคัญในการศึกษาการแพร่กระจายของมะเร็ง SK-GT-4 ยังแสดงการถอดรหัสของปัจจัยการเจริญเติบโตต่าง ๆ รวมถึง TGF-β และปัจจัยการเจริญเติบโตที่มาจากเกล็ดเลือด ซึ่งมีส่วนช่วยสร้างลักษณะทางฟีโนไทป์ที่ก้าวร้าวของเซลล์สายพันธุ์นี้ บทบาทที่ได้รับการยอมรับของเซลล์สายพันธุ์นี้ในการวิจัยเชิงประยุกต์ ย้ำถึงประโยชน์ของมันทั้งในด้านชีววิทยาพื้นฐานของโรคมะเร็งและการพัฒนายา

Tissue
หลอดอาหารส่วนปลาย
Disease
มะเร็งอะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • SKGT4
  • SK4

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
Doubling time
30–35 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
SK-GT-4 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305454)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: KRAS, แบบง่าย, p.Gly12Ala (c.35G>C), แบบเฮเทอโรไซกัส; การกลายพันธุ์: PIK3CA, แบบง่าย, p.Glu542Lys (c.1624G>A), แบบเฮเทอโรไซกัส; การกลายพันธุ์: TP53, แบบง่าย, p.Gln100Ter (c.298C>T), แบบโฮโมไซโกส
Viruses
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.1 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2–4 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
89 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน