Ga naar de inhoud
SK-GT-4
Weefsel
Slokdarm, distaal
Ziekte
adenocarcinoom
Synoniemen
SKGT4, SK4

Documenten

SK-GT-4

Cell line · Productnummer 305454

The SK-GT-4 cell line is a human esophageal adenocarcinoma model derived from primary adenocarcinoma arising in dysplastic Barrett's metaplasia of the dis...

€375.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De SK-GT-4-cellijn is een model voor humaan adenocarcinoom van de slokdarm, afkomstig van een primair adenocarcinoom dat is ontstaan uit dysplastische Barrett-metaplasie van het distale deel van de slokdarm. Deze cellijn maakt deel uit van de SK-GT-serie die is opgezet bij het Memorial Sloan-Kettering Cancer Center en heeft een belangrijke rol gespeeld bij het onderzoek naar de progressie van de slokdarm van Barrett naar adenocarcinoom van de slokdarm. SK-GT-4-cellen vertonen epitheliale kenmerken en dienen als een waardevol hulpmiddel voor het onderzoeken van moleculaire mechanismen van slokdarmkanker, met name die waarbij mutaties in het p53-tumorsuppressorgen betrokken zijn.

Genomische studies van SK-GT-4 hebben een mutatie in het TP53-gen geïdentificeerd, met name een G-naar-A-transitie bij codon 175 in exon 5, wat resulteert in een substitutie van arginine door histidine. Deze mutatie is in verband gebracht met chemoresistentie tegen DNA-beschadigende middelen zoals 5-fluorouracil, mitomycine C en cisplatine. Onderzoek wijst uit dat de mutatiestatus van p53 een aanzienlijke invloed heeft op de cellulaire respons op chemotherapie, waardoor de regulering van de celcyclus en apoptose in SK-GT-4-cellen worden beïnvloed. Deze kenmerken maken deze cellijn tot een cruciaal model voor het onderzoeken van therapeutische strategieën die gericht zijn op p53-gerelateerde signaalwegen.

SK-GT-4 is gebruikt om het invasiepotentieel van tumoren en de respons op groeifactoren bij adenocarcinoom van de slokdarm te evalueren. Deze cellijn heeft invasieve eigenschappen aangetoond in Boyden-kamerassays, wat het belang ervan voor het bestuderen van metastase onderstreept. SK-GT-4 brengt ook transcripten tot expressie voor diverse groeifactoren, waaronder TGF-β en de van bloedplaatjes afkomstige groeifactor, die bijdragen aan het agressieve fenotype ervan. De gevestigde rol van de cellijn in translationeel onderzoek onderstreept het nut ervan in zowel de fundamentele kankerbiologie als de ontwikkeling van geneesmiddelen.

Weefsel
Slokdarm, distaal
Ziekte
adenocarcinoom
Synoniemen
  • SKGT4
  • SK4

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcel
Verdubbelingstijd
30-35 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SK-GT-4 (Cytion-catalogusnummer 305454)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2195

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: KRAS, eenvoudig, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygoot; Mutatie: PIK3CA, eenvoudig, p.Glu542Lys (c.1624G>A), heterozygoot; Mutatie: TP53, eenvoudig, p.Gln100Ter (c.298C>T), homozygoot
Virussen
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2-4*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
89 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch