SKW-3

La lignée cellulaire SKW-3, dont on pensait à l'origine qu'elle provenait du sang périphérique d'un homme de 61 ans atteint de leucémie lymphoïde chronique (LLC), représente un point d'intérêt important dans la recherche sur le cancer, en particulier dans l'étude des leucémies à cellules B. Au fil du temps, des réévaluations critiques utilisant le profilage par courtes répétitions en tandem (STR) ont mis en lumière un problème important. Au fil du temps, des réévaluations critiques utilisant le profilage par Short Tandem Repeat (STR) ont mis en lumière un problème important : les cellules SKW-3 ne sont pas une lignée pure provenant du patient atteint de LLC, mais sont au contraire contaminées, et sont maintenant identifiées comme un dérivé de la lignée cellulaire KE-37. Cette révélation a de profondes implications pour les recherches passées et futures, soulignant la nécessité d'une authentification rigoureuse des lignées cellulaires pour garantir la précision des expériences.

KE-37, la véritable origine des cellules SKW-3, est une lignée de cellules B établie à partir d'un patient atteint de leucémie lymphoblastique aiguë (LLA). Ce changement d'origine de la LLC à la LAL, dû à la contamination, modifie radicalement le contexte biologique et l'utilité de la lignée SKW-3. Pour les chercheurs, cela signifie que toute découverte ou donnée précédemment attribuée à des mécanismes spécifiques à la LLC lors de l'utilisation de SKW-3 doit être évaluée de manière critique et potentiellement révisée. La reclassification en tant que dérivé de KE-37 nécessite un changement dans l'application des cellules SKW-3 vers des études plus pertinentes pour la LAL et ses mécanismes sous-jacents, plutôt que pour la LLC.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie