SKW-3

Die SKW-3-Zelllinie, von der ursprünglich angenommen wurde, dass sie aus dem peripheren Blut eines 61-jährigen Mannes stammt, bei dem chronische lymphatische Leukämie (CLL) diagnostiziert wurde, ist von großem Interesse für die Krebsforschung, insbesondere für die Untersuchung von B-Zell-Leukämien. Im Laufe der Zeit haben kritische Neubewertungen unter Verwendung von STR-Profilen (Short Tandem Repeat) ein wichtiges Problem ans Licht gebracht: Die KW-3-Zellen sind keine reine Linie des CLL-Patienten, sondern verunreinigt und wurden nun als Derivat der KE-37-Zelllinie identifiziert. Diese Enthüllung hat tiefgreifende Auswirkungen auf die bisherige Forschung und künftige Studien und unterstreicht die Notwendigkeit einer strengen Authentifizierung der Zelllinien, um die experimentelle Genauigkeit zu gewährleisten.

KE-37, der wahre Ursprung der SKW-3-Zellen, ist eine B-Zelllinie, die von einem Patienten mit akuter lymphatischer Leukämie (ALL) stammt. Diese Verschiebung der Herkunft von CLL zu ALL aufgrund der Kontamination verändert den biologischen Kontext und den Nutzen der SKW-3-Linie drastisch. Für die Forscher bedeutet dies, dass alle Ergebnisse oder Daten, die bei der Verwendung von SKW-3 bisher auf CLL-spezifische Mechanismen zurückgeführt wurden, kritisch bewertet und möglicherweise revidiert werden müssen. Die Neueinstufung als Derivat von KE-37 erfordert eine Verlagerung der Verwendung von SKW-3-Zellen auf Studien, die eher für die ALL und die ihr zugrunde liegenden Mechanismen als für die CLL relevant sind.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung