Preskoči na vsebino
SKW-3
Tkivo
Hematopoetski
Bolezen
T-celična levkemija (CLL)
Sinonimi
SKW3

Dokumenti

SKW-3

Cell line · Številka izdelka 300343

The SKW-3 cell line, originally believed to be derived from the peripheral blood of a 61-year-old male diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL), ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija SKW-3, ki naj bi bila prvotno pridobljena iz periferne krvi 61-letnega moškega z diagnozo kronične limfocitne levkemije (CLL), predstavlja pomembno točko zanimanja pri raziskavah raka, zlasti pri preučevanju levkemij celic B. Sčasoma so kritične ponovne ocene z uporabo profiliranja kratkih tandemskih ponovitev (STR) osvetlile pomembno vprašanje - celice SKW-3 niso čista linija bolnika s CLL, temveč so kontaminirane, zdaj so opredeljene kot derivat celične linije KE-37. To razkritje ima globoke posledice za pretekle raziskave in prihodnje študije ter poudarja potrebo po strogem preverjanju pristnosti celičnih linij, da bi zagotovili eksperimentalno natančnost.

KE-37, pravi izvor celic SKW-3, je linija celic B, pridobljena od bolnika z akutno limfoblastno levkemijo (ALL). Ta sprememba izvora iz CLL v ALL zaradi kontaminacije drastično spremeni biološki kontekst in uporabnost linije SKW-3. Za raziskovalce to pomeni, da je treba vse ugotovitve ali podatke, ki so bili prej pripisani mehanizmom, značilnim za CLL, pri uporabi linije SKW-3, kritično oceniti in morebiti spremeniti. Zaradi prerazvrstitve v derivat KE-37 je treba uporabo celic SKW-3 preusmeriti v študije, ki so bolj pomembne za ALL in njene osnovne mehanizme kot za CLL.

Tkivo
Hematopoetski
Bolezen
T-celična levkemija (CLL)
Sinonimi
  • SKW3

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Vrsta celice
Limfocit T
Čas podvojitve
30 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
SKW-3 (kataloška številka Cytion 300343)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2197

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
CD2+, CD3-, CD4+, CD8, Thy-1 podoben antigen
Izdelki
LECT2 (kemotaktični protein)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % toplotno aktiviranega FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 5 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 3 x 105 do 1 x 106 celic/ml.
Obnova po odtaljevanju
1 x 105/ml
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
27 let
Etnična pripadnost
Kavkaški