SKW-3

La linea cellulare SKW-3, originariamente ritenuta derivata dal sangue periferico di un uomo di 61 anni a cui era stata diagnosticata una leucemia linfocitica cronica (LLC), rappresenta un punto di interesse significativo nella ricerca sul cancro, in particolare nello studio delle leucemie a cellule B. Nel corso del tempo, le rivalutazioni critiche effettuate con il profilo delle ripetizioni in tandem brevi (STR) hanno messo in luce una questione importante: le celluleKW-3 non sono una linea pura proveniente dal paziente con LLC, ma sono invece contaminate, ora identificate come un derivato della linea cellulare KE-37. Questa rivelazione ha profonde implicazioni per la ricerca passata e per gli studi futuri, sottolineando la necessità di una rigorosa autenticazione delle linee cellulari per garantire l'accuratezza della sperimentazione.

KE-37, la vera origine delle cellule SKW-3, è una linea di cellule B ottenuta da un paziente affetto da leucemia linfoblastica acuta (LLA). Questo spostamento dell'origine da LLC ad ALL, dovuto alla contaminazione, altera drasticamente il contesto biologico e l'utilità della linea SKW-3. Per i ricercatori, ciò significa che qualsiasi risultato ottenuto è da escludere. Per i ricercatori, ciò significa che qualsiasi risultato o dato precedentemente attribuito a meccanismi specifici della LLC quando si utilizza SKW-3 deve essere valutato criticamente e potenzialmente rivisto. La riclassificazione in un derivato del KE-37 rende necessario uno spostamento dell'applicazione delle cellule SKW-3 verso studi più rilevanti per l'ALL e i suoi meccanismi di base, piuttosto che per la LLC.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia