SKW-3

Linia komórkowa SKW-3, pierwotnie uważana za pochodzącą z krwi obwodowej 61-letniego mężczyzny, u którego zdiagnozowano przewlekłą białaczkę limfocytową (CLL), stanowi istotny punkt zainteresowania w badaniach nad rakiem, szczególnie w badaniach nad białaczkami B-komórkowymi. Z biegiem czasu krytyczne ponowne oceny przy użyciu profilowania krótkich powtórzeń tandemowych (STR) ujawniły ważną kwestię - komórki SKW-3 nie są czystą linią pochodzącą od pacjenta z CLL, ale zamiast tego są zanieczyszczone, obecnie zidentyfikowane jako pochodna linii komórkowej KE-37. To odkrycie ma głęboki wpływ na dotychczasowe i przyszłe badania, podkreślając potrzebę rygorystycznego uwierzytelniania linii komórkowych w celu zapewnienia dokładności eksperymentalnej.

KE-37, prawdziwe pochodzenie komórek SKW-3, to linia komórek B uzyskana od pacjenta z ostrą białaczką limfoblastyczną (ALL). Ta zmiana pochodzenia z CLL na ALL, spowodowana zanieczyszczeniem, drastycznie zmienia kontekst biologiczny i użyteczność linii SKW-3. Dla badaczy oznacza to, że wszelkie ustalenia lub dane wcześniej przypisywane mechanizmom specyficznym dla CLL podczas korzystania z SKW-3 muszą zostać poddane krytycznej ocenie i potencjalnie zrewidowane. Zmiana klasyfikacji na pochodną KE-37 wymaga przesunięcia zastosowania komórek SKW-3 w kierunku badań bardziej istotnych dla ALL i jej podstawowych mechanizmów, a nie CLL.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym