SKW-3

A linha celular SKW-3, que inicialmente se pensava ser derivada do sangue periférico de um homem de 61 anos a quem foi diagnosticada leucemia linfocítica crónica (LLC), representa um ponto de interesse significativo na investigação do cancro, em especial no estudo das leucemias de células B. Ao longo do tempo, reavaliações críticas utilizando perfis de repetições curtas em tandem (STR) revelaram uma questão importante - as células SKW-3 não são uma linha pura do doente com LLC, mas estão contaminadas, sendo agora identificadas como um derivado da linha celular KE-37. Esta revelação tem implicações profundas na investigação passada e em estudos futuros, sublinhando a necessidade de uma autenticação rigorosa da linha celular para garantir a exatidão experimental.

A KE-37, a verdadeira origem das células SKW-3, é uma linha de células B estabelecida a partir de um doente com leucemia linfoblástica aguda (LLA). Esta mudança de origem de CLL para ALL, devido à contaminação, altera drasticamente o contexto biológico e a utilidade da linha SKW-3. Para os investigadores, isto significa que quaisquer descobertas ou dados anteriormente atribuídos a mecanismos específicos da LLC ao utilizar a linha SKW-3 têm de ser avaliados de forma crítica e potencialmente revistos. A reclassificação para um derivado da KE-37 obriga a uma mudança na aplicação das células SKW-3 para estudos mais relevantes para a LLA e os seus mecanismos subjacentes, em vez da LLC.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia