SKW-3

La línea celular SKW-3, que originalmente se creía derivada de la sangre periférica de un hombre de 61 años diagnosticado con leucemia linfocítica crónica (LLC), representa un punto de gran interés en la investigación del cáncer, particularmente en el estudio de las leucemias de células B. Con el tiempo, reevaluaciones críticas que utilizaron perfiles de repeticiones en tándem cortas (STR) han sacado a la luz un asunto importante: las células SKW-3 no son una línea pura del paciente con LLC, sino que están contaminadas y ahora se identifican como un derivado de la línea celular KE-37. Esta revelación tiene profundas implicaciones para las investigaciones pasadas y los estudios futuros, lo que resalta la necesidad de una autenticación rigurosa de las líneas celulares para garantizar la precisión experimental.

La KE-37, el verdadero origen de las células SKW-3, es una línea de células B establecida a partir de un paciente con leucemia linfoblástica aguda (LLA). Este cambio en el origen, de la CLL a la LLA, debido a la contaminación, altera drásticamente el contexto biológico y la utilidad de la línea SKW-3. Para los investigadores, esto significa que cualquier hallazgo o dato que se haya atribuido anteriormente a mecanismos específicos de la CLL al utilizar la línea SKW-3 debe evaluarse críticamente y, posiblemente, revisarse. La reclasificación como un derivado de la línea KE-37 exige un cambio en la aplicación de las células SKW-3 hacia estudios más relevantes para la LLA y sus mecanismos subyacentes, en lugar de la CLL.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.