SKW-3

SKW-3-cellinjen, som ursprungligen troddes härröra från perifert blod från en 61-årig man som diagnostiserats med kronisk lymfatisk leukemi (KLL), utgör en viktig intressepunkt inom cancerforskningen, särskilt när det gäller studier av B-cellsleukemier. Med tiden har kritiska omvärderingar med hjälp av STR-profilering (Short Tandem Repeat) belyst en viktig fråga -KW-3-cellerna är inte en ren linje från KLL-patienten, utan är i stället kontaminerade och har nu identifierats som ett derivat av KE-37-cellinjen. Detta avslöjande har djupgående konsekvenser för tidigare forskning och framtida studier, och understryker behovet av rigorös autentisering av cellinjer för att säkerställa experimentell noggrannhet.

KE-37, som är SKW-3-cellernas verkliga ursprung, är en B-cellslinje som etablerats från en patient med akut lymfatisk leukemi (ALL). Kontamineringen innebär att ursprunget ändras från KLL till ALL, vilket drastiskt förändrar SKW-3-linjens biologiska sammanhang och användbarhet. För forskare innebär detta att alla resultat eller data som tidigare tillskrivits KLL-specifika mekanismer när SKW-3 använts måste utvärderas kritiskt och eventuellt revideras. Omklassificeringen till ett derivat av KE-37 gör det nödvändigt att ändra användningen av SKW-3-celler till studier som är mer relevanta för ALL och dess underliggande mekanismer, snarare än för KLL.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring