SKW-3

La lignée cellulaire SKW-3, que l’on croyait à l’origine issue du sang périphérique d’un homme de 61 ans chez qui on avait diagnostiqué une leucémie lymphoïde chronique (LLC), présente un intérêt considérable pour la recherche sur le cancer, en particulier dans l’étude des leucémies à cellules B. Au fil du temps, des réévaluations approfondies utilisant le profilage par séquences en tandem courtes (STR) ont mis en lumière un problème important : les cellules SKW-3 ne constituent pas une lignée pure provenant du patient atteint de LLC, mais sont en réalité contaminées; elles sont désormais identifiées comme un dérivé de la lignée cellulaire KE-37. Cette révélation a de profondes répercussions sur les recherches passées et les études futures, soulignant la nécessité d’une authentification rigoureuse des lignées cellulaires pour garantir la précision expérimentale.

La lignée KE-37, véritable origine des cellules SKW-3, est une lignée de cellules B établie à partir d’un patient atteint de leucémie lymphoblastique aiguë (LLA). Ce changement d’origine, passant de la LLC à la LLA en raison de la contamination, modifie radicalement le contexte biologique et l’utilité de la lignée SKW-3. Pour les chercheurs, cela signifie que toute découverte ou donnée précédemment attribuée à des mécanismes spécifiques à la LLC lors de l’utilisation de la lignée SKW-3 doit être évaluée de manière critique et potentiellement révisée. La reclassification en dérivé de la lignée KE-37 nécessite une réorientation de l’utilisation des cellules SKW-3 vers des études plus pertinentes pour la LLA et ses mécanismes sous-jacents, plutôt que pour la LLC.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.