Mine otse sisu juurde
SKW-3
Kude
Hematopoeetiline
Haigus
T-rakuline leukeemia (CLL)
Sünonüümid
SKW3

Dokumendid

SKW-3

Cell line · Toote number 300343

The SKW-3 cell line, originally believed to be derived from the peripheral blood of a 61-year-old male diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL), ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SKW-3 rakuliin, mis on algselt arvatavasti pärit 61-aastase mehe perifeersest verest, kellel on diagnoositud krooniline lümfotsütaarne leukeemia (CLL), kujutab endast olulist huvi vähiuuringute, eriti B-rakkude leukeemiate uurimisel. Aja jooksul on lühikeste tandemkorduste (STR) profiilide abil tehtud kriitilised ümberhindamised valgustanud olulist küsimust - KW-3 rakud ei ole CLL-patsiendi puhas liin, vaid on hoopis saastunud, nüüdseks on need identifitseeritud KE-37 rakuliini derivaadina. See avastus mõjutab põhjalikult varasemaid ja tulevasi uuringuid, rõhutades, et katsete täpsuse tagamiseks on vaja ranget rakuliini autentimist.

KE-37, SKW-3 rakkude tegelik päritolu, on B-rakkude liin, mis on loodud ägeda lümfoblastilise leukeemiaga (ALL) patsiendilt. See päritolumuutus CLL-ist ALL-iks, mis on tingitud saastumisest, muudab oluliselt SKW-3 liini bioloogilist konteksti ja kasulikkust. Teadlaste jaoks tähendab see, et kõiki varem CLL-spetsiifilistele mehhanismidele omistatud tulemusi või andmeid SKW-3 kasutamisel tuleb kriitiliselt hinnata ja potentsiaalselt üle vaadata. Ümberklassifitseerimine KE-37 derivaadiks tingib vajaduse SKW-3 rakkude kasutamise muutmise, et uurida pigem ALL-i ja selle aluseks olevaid mehhanisme kui CLL-i.

Kude
Hematopoeetiline
Haigus
T-rakuline leukeemia (CLL)
Sünonüümid
  • SKW3

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
T-lümfotsüüt
Kahekordistumisaeg
30 tundi

04Tunnused

Viide
SKW-3 (Cytioni katalooginumber 300343)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2197

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
CD2+, CD3-, CD4+, CD8, Thy-1-sarnane antigeen
Tooted
LECT2 (kemotaktiline valk)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Taastumine pärast sulamist
1 x 105/ml
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
27 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia