Tartalomra ugrás
SKW-3
Szövet
Vérképzőszervi
Betegség
T-sejtes leukémia (CLL)
Szinonimák
SKW3

Dokumentumok

SKW-3

Cell line · Termékszám 300343

The SKW-3 cell line, originally believed to be derived from the peripheral blood of a 61-year-old male diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL), ...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az SKW-3 sejtvonal, amely eredetileg egy 61 éves férfi perifériás véréből származik, akinél krónikus limfocitális leukémiát (CLL) diagnosztizáltak, jelentős érdeklődésre tart számot a rákkutatásban, különösen a B-sejtes leukémiák tanulmányozásában. Idővel a rövid tandemismétlődések (STR) profilozását alkalmazó kritikus újraértékelések rávilágítottak egy fontos kérdésre - aKW-3 sejtek nem a CLL-beteg tiszta vonalából származnak, hanem kontamináltak, és most a KE-37 sejtvonal származékaként azonosították őket. Ez a felfedezés mélyreható következményekkel jár a korábbi kutatásokra és a jövőbeli vizsgálatokra nézve, hangsúlyozva a szigorú sejtvonal-hitelesítés szükségességét a kísérleti pontosság biztosítása érdekében.

A KE-37, az SKW-3 sejtek valódi eredete egy akut limfoblasztos leukémiában (ALL) szenvedő betegből létrehozott B-sejtvonal. A CLL-ről ALL-re való eredetnek ez a kontamináció miatti eltolódása drasztikusan megváltoztatja az SKW-3 vonal biológiai kontextusát és hasznosságát. A kutatók számára ez azt jelenti, hogy az SKW-3 felhasználása során korábban CLL-specifikus mechanizmusoknak tulajdonított megállapításokat vagy adatokat kritikusan kell értékelni és esetleg felül kell vizsgálni. A KE-37 származékává történő átminősítés szükségessé teszi az SKW-3 sejtek alkalmazásának eltolását a CLL helyett az ALL és a mögöttes mechanizmusok szempontjából relevánsabb vizsgálatok irányába.

Szövet
Vérképzőszervi
Betegség
T-sejtes leukémia (CLL)
Szinonimák
  • SKW3

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Kerek cellák
Sejttípus
T-limfocita
Kettőzési idő
30 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
SKW-3 (Cytion katalógusszám: 300343)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2197

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
CD2+, CD3-, CD4+, CD8, Thy-1-szerű antigén
Termékek
LECT2 (kemotaktikus fehérje)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki
Átültetés
A tenyészeteket a táptalaj rendszeres hozzáadásával vagy cseréjével tartsa fenn. A tenyészeteket 5 x 105 sejt/ml sűrűséggel indítsa el, és az optimális növekedés érdekében tartsa a sejtkoncentrációt 3 x 105 és 1 x 106 sejt/ml közötti tartományban.
Az olvadás utáni helyreállás
1 x 105/ml
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
27 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi