SKW-3

La línea celular SKW-3, que en un principio se creía que procedía de la sangre periférica de un varón de 61 años diagnosticado de leucemia linfocítica crónica (LLC), representa un importante punto de interés en la investigación del cáncer, especialmente en el estudio de las leucemias de células B. Con el tiempo, las reevaluaciones críticas mediante perfiles de repeticiones cortas en tándem (STR) han sacado a la luz una cuestión importante: las células SKW-3 no son una línea pura procedente del paciente con LLC, sino que están contaminadas, identificadas ahora como un derivado de la línea celular KE-37. Esta revelación tiene profundas implicaciones para las investigaciones anteriores y los estudios futuros, y subraya la necesidad de una rigurosa autentificación de las líneas celulares para garantizar la precisión experimental.

KE-37, el verdadero origen de las células SKW-3, es una línea de células B establecida a partir de un paciente con leucemia linfoblástica aguda (LLA). Este cambio de origen de LLC a LLA, debido a la contaminación, altera drásticamente el contexto biológico y la utilidad de la línea SKW-3. Para los investigadores, esto significa que cualquier hallazgo o dato atribuido previamente a mecanismos específicos de la LLC al utilizar SKW-3 debe ser evaluado críticamente y potencialmente revisado. La reclasificación a un derivado de KE-37 requiere un cambio en la aplicación de las células SKW-3 hacia estudios más relevantes para la LLA y sus mecanismos subyacentes, en lugar de la LLC.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía