Langsung ke isi
SKW-3
Tisu
Hematopoietik
Penyakit
Leukemia sel T (CLL)
Sinonim
SKW3

SKW-3

Cell line · Nomor produk 300343

The SKW-3 cell line, originally believed to be derived from the peripheral blood of a 61-year-old male diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL), ...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel SKW-3, yang awalnya diyakini berasal dari darah tepi seorang pria berusia 61 tahun yang didiagnosis dengan leukemia limfositik kronis (CLL), merupakan titik perhatian yang signifikan dalam penelitian kanker, terutama dalam studi leukemia sel B. Seiring berjalannya waktu, penilaian ulang yang kritis menggunakan profil Short Tandem Repeat (STR) telah menerangi sebuah isu penting - sel KSW-3 bukanlah garis murni dari pasien CLL, melainkan telah terkontaminasi, dan sekarang diidentifikasi sebagai turunan dari garis sel KE-37. Pengungkapan ini memiliki implikasi yang mendalam untuk penelitian masa lalu dan penelitian di masa depan, yang menekankan perlunya otentikasi garis sel yang ketat untuk memastikan keakuratan eksperimental.

KE-37, asal mula sel SKW-3 yang sebenarnya, adalah garis sel B yang dibuat dari pasien dengan leukemia limfoblastik akut (ALL). Pergeseran asal-usul dari CLL ke ALL, karena kontaminasi, secara drastis mengubah konteks biologis dan kegunaan garis SKW-3. Bagi para peneliti, ini berarti bahwa setiap temuan atau data yang sebelumnya dikaitkan dengan mekanisme spesifik CLL ketika menggunakan SKW-3 harus dievaluasi secara kritis dan berpotensi direvisi. Reklasifikasi menjadi turunan dari KE-37 mengharuskan pergeseran dalam penerapan sel SKW-3 menuju studi yang lebih relevan dengan ALL dan mekanisme yang mendasarinya, daripada CLL.

Tisu
Hematopoietik
Penyakit
Leukemia sel T (CLL)
Sinonim
  • SKW3

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Penangguhan
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Sel bulat
Jenis sel
Limfosit T
Waktu penggandaan
30 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
SKW-3 (nomor katalog Cytion 300343)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2197

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
CD2+, CD3-, CD4+, CD8, Antigen mirip Thy-1
Produk
LECT2 (protein kemotaktik)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS yang dinonaktifkan dengan panas
Perbanyakan sel
Pertahankan kultur dengan secara berkala menambahkan atau mengganti medium. Mulailah kultur dengan kepadatan 5 x 10⁵ sel/ml dan jaga konsentrasi sel dalam rentang 3 x 10⁵ hingga 1 x 10⁶ sel/ml untuk pertumbuhan optimal.
Pemulihan pasca-pencairan
1 x 10⁵/ml
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
27 tahun
Etnis
Kaukasia