الانتقال إلى المحتوى
SKW-3
الأنسجة
المكونة للدم
المرض
ابيضاض الدم الخلايا التائية (CLL)
المرادفات
SKW3

المستندات

SKW-3

Cell line · رقم المنتج 300343

The SKW-3 cell line, originally believed to be derived from the peripheral blood of a 61-year-old male diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL), ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يمثل خط خلايا SKW-3، الذي كان يُعتقد في الأصل أنه مشتق من الدم المحيطي لرجل يبلغ من العمر 61 عامًا تم تشخيص إصابته بسرطان الدم الليمفاوي المزمن (CLL)، نقطة اهتمام كبيرة في أبحاث السرطان، وخاصة في دراسة سرطان الدم ذي الخلايا البائية. وبمرور الوقت، أضاءت عمليات إعادة التقييم الحاسمة باستخدام التنميط التكراري الترادفي القصير (STR) قضية مهمة - فخلايا الخلايا (KKW-3) ليست خطًا نقيًا من مريض سرطان الدم الليمفاوي المزمن CLL، بل هي خلايا ملوثة، تم تحديدها الآن على أنها مشتقة من خط الخلايا KE-37. هذا الاكتشاف له آثار عميقة على الأبحاث السابقة والدراسات المستقبلية، مما يؤكد الحاجة إلى مصادقة صارمة لخط الخلايا لضمان دقة التجربة.

إن KE-37، الأصل الحقيقي لخلايا SKW-37، هو خط الخلايا البائية الذي تم إنشاؤه من مريض مصاب بسرطان الدم الليمفاوي الحاد (ALL). يؤدي هذا التحول في الأصل من سرطان الدم الليمفاوي الحاد إلى سرطان الدم الليمفاوي الحاد، بسبب التلوث، إلى تغيير السياق البيولوجي وفائدة خط SKW-3 بشكل كبير. بالنسبة للباحثين، هذا يعني أن أي نتائج أو بيانات نُسبت سابقًا إلى الآليات الخاصة بسرطان الدم الليمفاوي الحاد (CLL) عند استخدام سلالة SKW-3 يجب تقييمها بشكل نقدي وربما مراجعتها. تستلزم إعادة التصنيف إلى أحد مشتقات KE-37 تحولاً في تطبيق خلايا SKW-3 نحو دراسات أكثر صلة بمرض سرطان الدم الليمفاوي المزمن وآلياته الأساسية، بدلاً من سرطان الدم الليمفاوي المزمن.

الأنسجة
المكونة للدم
المرض
ابيضاض الدم الخلايا التائية (CLL)
المرادفات
  • SKW3

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا الدائرية
نوع الخلية
الخلايا اللمفاوية التائية
زمن المضاعفة
30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
SKW-3 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300343)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2197

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
CD2+، CD3-، CD3-، CD4+، CD8، مستضد شبيه بالمستضد Thy-1
المنتجات
ليكت 2 (بروتين التحفيز الكيميائي)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط
إعادة الاستنبات
حافظ على الثقافات عن طريق إضافة أو استبدال الوسط بشكل دوري. ابدأ الثقافات بكثافة 5 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا في نطاق 3 × 105 إلى 1 × 106 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل.
التعافي بعد ذوبان الجليد
1 × 105/مل
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
27 سنة
الأصل العرقي
قوقازي