SKW-3

De SKW-3 cellijn, oorspronkelijk afkomstig uit het perifere bloed van een 61-jarige man met de diagnose chronische lymfatische leukemie (CLL), vertegenwoordigt een belangrijk aandachtspunt in het kankeronderzoek, met name in de studie van B-cel leukemieën. Na verloop van tijd hebben kritische herbeoordelingen met behulp van Short Tandem Repeat (STR) profilering een belangrijke kwestie aan het licht gebracht: deKW-3 cellen zijn geen zuivere lijn van de CLL-patiënt, maar zijn in plaats daarvan besmet, nu geïdentificeerd als een afgeleide van de KE-37 cellijn. Deze onthulling heeft ingrijpende gevolgen voor eerdere onderzoeken en toekomstige studies en benadrukt de noodzaak van strenge verificatie van cellijnen om experimentele nauwkeurigheid te garanderen.

KE-37, de echte oorsprong van de SKW-3 cellen, is een B-cellijn afkomstig van een patiënt met acute lymfoblastaire leukemie (ALL). Deze verschuiving in de oorsprong van CLL naar ALL, als gevolg van de contaminatie, verandert de biologische context en bruikbaarheid van de SKW-3 lijn drastisch. Voor onderzoekers betekent dit dat alle bevindingen of gegevens die eerder werden toegeschreven aan CLL-specifieke mechanismen bij het gebruik van SKW-3 kritisch moeten worden geëvalueerd en mogelijk moeten worden herzien. De herclassificatie tot een afgeleide van KE-37 vereist een verschuiving in de toepassing van SKW-3 cellen naar studies die relevanter zijn voor ALL en de onderliggende mechanismen, in plaats van CLL.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring