HT-29-MTX-E12

HT-29-MTX-E12는 점액 분비 표현형으로 분화를 유도하는 메토트렉세이트(MTX)로 선택 과정을 거쳐 인간 대장 선암 세포주 HT29에서 추출한 고블릿 세포와 유사한 서브클론입니다. HT29-MTX에서 개발된 여러 하위 클론 중 E12 하위 클론은 접합부가 단단하고 정단 표면에 상당히 두껍고 연속적인 점액층이 있는 합류성 단층을 견고하게 형성한다는 점에서 두드러집니다. 이 서브클론은 알시안 블루 염색, 투과 전자 현미경(TEM), 뮤신 유전자 MUC1 및 MUC2의 발현으로 입증된 것처럼 성숙한 고블릿 세포의 비율이 더 높은 것이 특징입니다. 실제로 다른 서브클론 및 모세포인 HT29 세포에 비해 HT-29-MTX-E12에서 MUC1 및 MUC2 mRNA 수준이 상당히 높았으며, 이는 생체 내 장 환경과 유사한 약 142 ± 51 µm의 점액 두께와 상관관계가 있는 것으로 나타났습니다.

기능적으로 HT-29-MTX-E12는 특히 친유성 약물의 흡수를 평가할 때 인간 장 점액층의 장벽 특성을 모델링하는 것으로 나타났습니다. 두꺼운 점액 장벽이 존재하면 점액이 없는 Caco-2 세포와 비교할 때 테스토스테론 및 다양한 바르비투르산염과 같은 친유성 화합물의 겉보기 투과성 계수(Papp)가 현저히 감소합니다. 예를 들어, 테스토스테론은 HT-29-MTX-E12에서 Papp가 43% 감소한 것으로 나타나 점액이 약물 확산에 미치는 영향을 강조했습니다. HT-29-MTX-E12는 Caco-2 세포보다 상피 장벽이 더 누출되어 있음에도 불구하고 점액 생성 능력을 통해 생리적 관련성을 유지하므로 장내 약물 흡수와 점액이 투과성에 미치는 영향을 조사하는 데 유용한 시험관 내 모델입니다.

37°C, 5%_CO2, 습한 대기.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

싸이티온은 제품의 품질과 생존력을 보증합니다. 당사는 당사 시설에서 배송된 후 60일 동안 배양 시작 시 세포가 생존할 수 있음을 보증합니다. 당사는 모든 재료가 분석 증명서 및/또는 제품 시트에 설명된 사양을 준수함을 보증합니다

자세한 내용은 <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">보증서 를 참조하시기 바랍니다