Pereiti prie turinio
HT22
Audinys
Smegenys, hipokampas
Sinonimai
HT-22

Dokumentai

HT22

Cell line · Prekės numeris 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HT22 ląstelių linija - nemortizuotas subklonas, gautas iš pelių hipokampo HT4 ląstelių - yra labai svarbi atliekant neurofarmakologinius tyrimus. HT22 ląstelės, atsiradusios imortalizuojant pelių neuronų audinius temperatūrai jautriu SV40 T-antigenu, yra unikalus in vitro modelis tiriant mechanizmus, kuriais grindžiamas glutamato sukeltas citotoksiškumas, kuris vaidina svarbų vaidmenį sergant neurodegeneracinėmis ligomis, pavyzdžiui, Alzheimerio, Huntingtono ir Parkinsono ligomis.

HT22 ląstelės pasižymi neuronų fenotipu ir yra labai jautrios glutamatui - esminiam jaudinančiam neuromediatoriui, kuris dalyvauja tokiose svarbiausiose smegenų funkcijose kaip pažinimas, mokymasis ir atmintis. Tačiau per didelis glutamato kiekis gali sukelti glutamato toksiškumą ir pernelyg didelį nervinių ląstelių sužadinimą, dėl kurio ląstelės pažeidžiamos arba žūsta, naudojant oksidacinio streso ir apoptozės mechanizmus.

HT22 pelių hipokampo ląstelės naudojamos neurotoksiškumo tyrimuose, pavyzdžiui, tiriant izoflurano poveikį, tiriant chromatino kraštovaizdį ir epigenetinius požymius, taip pat tiriant serotoninerginio poveikio poveikį hipokampo neurogenezei. Pastarasis tyrimas apima serotonino reabsorbcijos inhibitorių ir jų vaidmens antidepresantų atrankoje tyrimus, taip pat serotonino transporterio (SERT) glikozilinimo poveikį neuronų funkcijoms.

HT22 ląstelių linija, pasižyminti gerai apibūdinta reakcija į glutamatą ir naudingumu tiriant serotoninerginę sistemą, ir toliau išlieka vertinga priemone tobulinant neurofarmakologiją ir kuriant įvairių neurologinių sutrikimų gydymo būdus.

Audinys
Smegenys, hipokampas
Sinonimai
  • HT-22

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
HT22 (Cytion katalogo numeris 305158)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 50 % bazinę terpę + 40 % FBS + 10 % DMSO arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.