Preskoči na vsebino
HT22
Tkivo
Možgani, hipokampus
Sinonimi
HT-22

Dokumenti

HT22

Cell line · Številka izdelka 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HT22, imortaliziran podklon, ki izhaja iz celic HT4 mišjega hipokampusa, je ključna za nevrofarmakološke raziskave. Celice HT22, ki so nastale z imortalizacijo mišjih nevronskih tkiv s temperaturno občutljivim T-antigenom SV40, so edinstven in vitro model za raziskovanje mehanizmov, ki so podlaga za citotoksičnost, povzročeno z glutamatom, ki ima pomembno vlogo pri nevrodegenerativnih boleznih, kot so Alzheimerjeva, Huntingtonova in Parkinsonova bolezen.

Celice HT22 imajo nevronski fenotip in so zelo občutljive na glutamat, ki je pomemben ekscitatorni nevrotransmiter, vključen v ključne možganske funkcije, kot so kognicija, učenje in spomin. Vendar pa lahko prekomerno uživanje glutamata privede do glutamatne toksičnosti in pretiranega vzburjenja živčnih celic, kar povzroči poškodbe ali smrt celic z mehanizmi, ki vključujejo oksidativni stres in apoptozo.

Mišje hipokampalne celice HT22 se uporabljajo v študijah nevrotoksičnosti, na primer pri preučevanju učinkov izpostavljenosti izofluranu, za raziskovanje kromatinske krajine in epigenetskih znakov ter za preučevanje učinkov serotonergičnega vnosa na hipokampalno nevrogenezo. Slednje vključuje preučevanje zaviralcev ponovnega privzema serotonina in njihove vloge pri pregledovanju antidepresivov ter vpliva glikozilacije serotoninskega transporterja (SERT) na delovanje nevronov.

Celična linija HT22 z dobro opisanim odzivom na glutamat in uporabnostjo pri preučevanju serotoninergičnega sistema ostaja dragoceno orodje pri napredku nevrofarmakologije in razvoju zdravljenja številnih nevroloških motenj.

Tkivo
Možgani, hipokampus
Sinonimi
  • HT-22

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
HT22 (kataloška številka Cytion 305158)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 50 % osnovno gojišče + 40 % FBS + 10 % DMSO ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.