Ga naar de inhoud
HT22
Weefsel
Hersenen, hippocampus
Synoniemen
HT-22

Documenten

HT22

Cell line · Productnummer 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HT22-cellijn, een geïmmortaliseerde subkloon afgeleid van HT4-cellen van de muizenhippocampus, is van cruciaal belang in neurofarmacologisch onderzoek. HT22-cellen zijn ontstaan door immortalisatie van neuronale weefsels van muizen met een temperatuurgevoelig SV40 T-antigeen en bieden een uniek in vitro model om de mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan glutamaat-geïnduceerde cytotoxiciteit, die een belangrijke rol speelt bij neurodegeneratieve aandoeningen zoals de ziekten van Alzheimer, Huntington en Parkinson.

HT22 cellen vertonen een neuronaal fenotype en zijn zeer gevoelig voor glutamaat, een essentiële exciterende neurotransmitter die betrokken is bij kritieke hersenfuncties zoals cognitie, leren en geheugen. Overmatige inname van glutamaat kan echter leiden tot glutamaattoxiciteit en overprikkeling van zenuwcellen, waardoor celbeschadiging of -sterfte optreedt via mechanismen waarbij oxidatieve stress en apoptose een rol spelen.

HT22 hippocampale muizencellen worden gebruikt in neurotoxiciteitsstudies, zoals studies naar de effecten van blootstelling aan isofluraan, om het chromatinelandschap en epigenetische kenmerken te onderzoeken en om de effecten van serotonerge input op hippocampale neurogenese te onderzoeken. Dit laatste omvat het onderzoek naar serotonineheropnameremmers en hun rol bij het screenen van antidepressiva, evenals de invloed van glycosylering van serotoninetransporter (SERT) op neuronale functies.

De HT22-cellijn, met zijn goed gekarakteriseerde respons op glutamaat en zijn nut voor het bestuderen van het serotonerge systeem, blijft een waardevol hulpmiddel voor de vooruitgang van de neurofarmacologie en de ontwikkeling van behandelingen voor een reeks neurologische aandoeningen.

Weefsel
Hersenen, hippocampus
Synoniemen
  • HT-22

02Classificatie

Organisme
Muis
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HT22 (Cytion catalogusnummer 305158)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.