Prejsť na obsah
HT22
Tkanivo
Mozog, hipokampus
Synonymá
HT-22

Dokumenty

HT22

Cell line · Číslo výrobku 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia HT22, imortalizovaný subklon odvodený z buniek HT4 myšieho hipokampu, je kľúčová v neurofarmakologickom výskume. Bunky HT22, ktoré vznikli imortalizáciou myších neurónových tkanív pomocou teplotne citlivého T-antigénu SV40, ponúkajú jedinečný in vitro model na skúmanie mechanizmov, ktoré sú základom glutamátom indukovanej cytotoxicity, ktorá hrá významnú úlohu pri neurodegeneratívnych poruchách, ako sú Alzheimerova, Huntingtonova a Parkinsonova choroba.

Bunky HT22 vykazujú neuronálny fenotyp a sú vysoko citlivé na glutamát, základný excitačný neurotransmiter, ktorý sa podieľa na kritických funkciách mozgu, ako je poznávanie, učenie a pamäť. Nadmerný príjem glutamátu však môže viesť k glutamátovej toxicite a nadmernej excitácii nervových buniek, čo spôsobuje poškodenie alebo smrť buniek prostredníctvom mechanizmov, ktoré zahŕňajú oxidačný stres a apoptózu.

Myšie hipokampálne bunky HT22 sa využívajú v štúdiách neurotoxicity, napríklad pri skúmaní účinkov expozície izofluránu, na skúmanie chromatínovej krajiny a epigenetických znakov a na skúmanie účinkov serotonínergického vstupu na hipokampálnu neurogenézu. Posledné uvedené zahŕňa štúdium inhibítorov spätného vychytávania serotonínu a ich úlohu pri skríningu antidepresív, ako aj vplyv glykozylácie serotonínového transportéra (SERT) na funkciu neurónov.

Bunková línia HT22 s dobre charakterizovanou reakciou na glutamát a jej využiteľnosťou pri štúdiu serotonínergického systému je naďalej cenným nástrojom pri napredovaní neurofarmakológie a vývoji liečby celého radu neurologických porúch.

Tkanivo
Mozog, hipokampus
Synonymá
  • HT-22

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
HT22 (katalógové číslo Cytion 305158)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 50 % bazálne médium + 40 % FBS + 10 % DMSO alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.