Gå direkte til indholdet
HT22
Væv
Hjerne, hippocampus
Synonymer
HT-22

Dokumenter

HT22

Cell line · Varenummer 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HT22-cellelinjen, en udødeliggjort subklon, der stammer fra HT4-celler i musens hippocampus, er central i neurofarmakologisk forskning. HT22-cellerne stammer fra udødeliggørelse af neuronalt væv fra mus med et temperaturfølsomt SV40 T-antigen og er en unik in vitro-model til at undersøge de mekanismer, der ligger til grund for glutamat-induceret cytotoksicitet, som spiller en vigtig rolle i neurodegenerative sygdomme som Alzheimers, Huntingtons og Parkinsons sygdomme.

HT22-celler udviser en neuronal fænotype og er meget følsomme over for glutamat, en essentiel excitatorisk neurotransmitter, der er involveret i kritiske hjernefunktioner som kognition, indlæring og hukommelse. Men overdreven indtagelse af glutamat kan føre til glutamattoksicitet og overstimulering af nerveceller, hvilket forårsager celleskader eller -død gennem mekanismer, der involverer oxidativ stress og apoptose.

HT22-hippocampusceller fra mus anvendes i neurotoksicitetsundersøgelser, f.eks. dem, der undersøger virkningerne af isofluraneksponering, til at udforske kromatinlandskabet og epigenetiske signaturer og til at undersøge virkningerne af serotonerge input på hippocampusneurogenese. Sidstnævnte omfatter undersøgelse af serotonin-genoptagelseshæmmere og deres rolle i screening af antidepressiva samt virkningen af serotonintransportørens (SERT) glykosylering på neuronal funktion.

HT22-cellelinjen med dens velkarakteriserede respons på glutamat og dens anvendelighed til at studere det serotonerge system er fortsat et værdifuldt værktøj i udviklingen af neurofarmakologi og udviklingen af behandlinger for en række neurologiske lidelser.

Væv
Hjerne, hippocampus
Synonymer
  • HT-22

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HT22 (Cytion-katalognummer 305158)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.