Gå til innholdet
HT22
Vev
Hjerne, hippocampus
Synonymer
HT-22

Dokumenter

HT22

Cell line · Produktnummer 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HT22-cellelinjen, en udødeliggjort subklon avledet fra HT4-celler fra musens hippocampus, er sentral i nevrofarmakologisk forskning. HT22-cellene stammer fra udødeliggjøring av nervevev fra mus med et temperaturfølsomt SV40 T-antigen, og er en unik in vitro-modell for å undersøke mekanismene som ligger til grunn for glutamatindusert cytotoksisitet, som spiller en viktig rolle i nevrodegenerative sykdommer som Alzheimers, Huntingtons og Parkinsons sykdom.

HT22-celler har en nevronal fenotype og er svært følsomme for glutamat, en viktig eksitatorisk nevrotransmitter som er involvert i kritiske hjernefunksjoner som kognisjon, læring og hukommelse. For høyt inntak av glutamat kan imidlertid føre til glutamattoksisitet og overstimulering av nerveceller, noe som kan forårsake celleskader eller celledød gjennom mekanismer som involverer oksidativt stress og apoptose.

HT22-hippocampusceller fra mus brukes i nevrotoksisitetsstudier, blant annet for å undersøke effekten av isofluraneksponering, for å utforske kromatinlandskapet og epigenetiske signaturer, og for å undersøke effekten av serotonerge tilførsler på hippocampus' nevrogenese. Sistnevnte inkluderer studier av serotoninreopptakshemmere og deres rolle i screening av antidepressiva, samt virkningen av serotonintransportørens (SERT) glykosylering på nevronal funksjon.

HT22-cellelinjen, med sin velkarakteriserte respons på glutamat og sin anvendelighet i studier av det serotonerge systemet, fortsetter å være et verdifullt verktøy i utviklingen av nevrofarmakologi og i utviklingen av behandlinger for en rekke nevrologiske lidelser.

Vev
Hjerne, hippocampus
Synonymer
  • HT-22

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HT22 (Cytion-katalognummer 305158)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.